应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 往培养的细胞里加入GM132，想抑制蛋白降解，结果细胞为什么都死了?
31/1返回列表
查看: 4514  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Xshin2829

新虫 (初入文坛)

[求助] 往培养的细胞里加入GM132，想抑制蛋白降解，结果细胞为什么都死了?

我想检测两个蛋白的互作，把两种质粒共转进293T细胞后，发现其中一种蛋白对另一种蛋白有降解作用，于是在转染之后加入蛋白酶体抑制剂MG132，按照说明书上说的，用DMSO溶解，所用浓度为18.5μmol。我先用DMSO溶解MG132，得到浓度为185μmol的溶液，然后5μl加到有495μl培养液的细胞培养孔中，这样MG132的终浓度就是1.85μmol了，因为试剂不够用，我都这样缩小10倍使用了，可是三小时后细胞全都死亡破碎了，我觉得可能是DMSO对细胞有毒害作用或是MG132的浓度太高了，又缩小了2倍使用，细胞还是死了，请问我是不是哪里做错了，想不通啊，求助!

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2018-08-26 01:04:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

s272605623

新虫 (初入文坛)
我最近做的实验使用浓度是1μM，细胞是EA.hy926细胞，作用了72h发现细胞全部死光。不知道仁兄现在探索的怎么样了?
赞一下 回复此楼
2楼2018-12-05 20:55:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Xshin2829

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by s272605623 at 2018-12-05 20:55:58
我最近做的实验使用浓度是1μM，细胞是EA.hy926细胞，作用了72h发现细胞全部死光。不知道仁兄现在探索的怎么样了?

作用时间太长了细胞就会死掉的，一般就加6-8小时就可以收样了。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2019-01-17 21:31:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Xshin2829 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 生物学学硕求调剂 +6 小羊睡着了? 2026-03-23 9/450 2026-03-24 20:21 by 小羊睡着了?
[考研] 0854 考研调剂 招生了！AI 方向 +5 pk3725069 2026-03-19 17/850 2026-03-24 17:30 by zhouxuan..
[考研] 材料学硕，求调剂 6+3 糖葫芦888ll 2026-03-22 7/350 2026-03-24 17:11 by hello七七
[考研] 【双一流院校新能源、环境材料，材料加工与模拟招收大量调剂】 +4 Higraduate 2026-03-22 7/350 2026-03-24 11:23 by 种大树
[考研] 一志愿国科过程所081700，274求调剂 +3 三水研0水立方 2026-03-23 3/150 2026-03-23 23:11 by MajorWen
[考研] 361求调剂 +3 Glack 2026-03-22 3/150 2026-03-23 22:03 by fuyu_
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +5 niko- 2026-03-22 5/250 2026-03-23 22:01 by fuyu_
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +8 tcxiaoxx 2026-03-20 9/450 2026-03-23 12:16 by tcxiaoxx
[考研] 315分，诚求调剂，材料与化工085600 +3 13756423260 2026-03-22 3/150 2026-03-22 20:11 by edmund7
[考研] 求调剂一志愿海大，0703化学学硕304分，有大创项目，四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
[考研] 269专硕求调剂 +6 金恩贝 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:31 by ColorlessPI
[考研] 280求调剂 +11 咕噜晓晓 2026-03-18 12/600 2026-03-21 22:40 by ACS Nano——
[考研] 297求调剂 +11 戏精丹丹丹 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:47 by ColorlessPI
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[基金申请] 学校已经提交到NSFC，还能修改吗？ 40+4 babangida 2026-03-19 9/450 2026-03-21 16:12 by babangida
[考研] 265求调剂 +12 梁梁校校 2026-03-19 14/700 2026-03-21 13:38 by lature00
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:32 by JourneyLucky
[考研] 330求调剂 +4 小材化本科 2026-03-18 4/200 2026-03-20 23:13 by JourneyLucky
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭