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小波涛有点荡

新虫 (初入文坛)

[求助] 色谱柱冲洗？ 已有1人参与

分析流动相使用的是磷酸盐，检测某多肽，发现检测主峰后面多出一个峰紧挨着主峰，进空白后没有杂峰，另一台HPLC上是没有这个峰，新启用的色谱柱，被其他同事走空两次，流动相使用乙腈水冲洗后依然不见效果！！
希望各位大佬能解决这个问题，如何有效的冲洗，冲洗常用方式！色谱柱使用的是安捷伦C18柱子

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1楼 2018-08-25 15:16:59
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saowe

木虫 (正式写手)
是否是样品本身的问题。

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2楼2018-08-25 19:25:04
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王其超

新虫 (小有名气)
走空，进空气了吧

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3楼2018-08-26 10:57:12
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zzlyaoxue

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
其实原因有很多种：
第一，可能是样品本身就有这个杂质峰，你说换了另一台液相就没有这个峰，不知道你用的是同一品牌还是不同品牌仪器，因为不同厂家仪器的灵敏度是不一样的。
第二，分析方法重现性较差，简单来说就是方法需要进行优化，不能完全洗脱与主峰相邻的杂质峰。
第三，如果是色谱柱问题，建议你重新更换色谱柱重新进样试试。冲洗方式按照说明书要求进行，比如流动相中含10%乙腈，可用10%乙腈水溶液多冲洗一段时间。
以上均属于个人观点，仅供参考而已！
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天道不一定酬勤，但公道自在人心
4楼2018-08-26 18:20:26
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jsjianbang

新虫 (初入文坛)
前几天看到一篇好文，FDA发出关于日本协和Kyowa Hakko Bio Co., Ltd的警告信，缺陷包括：HPLC系统无审计追踪或未激活、未使用唯一用户名和密码使用HPLC系统等等。因此，使用未受控的色谱柱确实有风险！
虽然你需要的是分析，我仍旧推荐制备用的SepaBean machine液相制备系统，因为它是有记忆的色谱系统，及时断电也可以恢复数据哦~
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5楼2018-08-27 13:25:58
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