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[交流]
氨基酸分析中的问题
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请教一下虫友们，最近在用PITC衍生试剂做氨基酸组成分析 流动相A：0.1mol/L醋酸钠溶液（无水醋酸钠8.2g,加水1000ml溶解，用10%醋酸调节pH至6.5）-乙腈（93：7） 流动相B：乙腈-水（80:20） 流速：1.0ml/min 检测波长：254 运行时间：30min 柱温：40℃ 进样体积：5ul 时间（min） 流动相A 流动相B 0 100 0 4 100 0 12 90 10 25 60 40 25.5 0 100 28.5 0 100 28.6 100 0 32 100 0 取0.1 mol/LHCl溶液、氨基酸对照品溶液和供试品溶液各200ul，分别置进样小瓶中，加1mol/L三乙胺乙腈溶液100ul，加入1mol/L异硫氰酸苯酯（PITC）乙腈溶液100ul，摇匀，室温放置1h，加入400ul正己烷，放置10min，取下层溶液，过滤。 18中氨基酸中只有Asp和Glu衍生后出峰均是是两个分裂峰，同样操作其他氨基酸均是正常一个峰，请问这个是什么原因呢？重复多次均是这样的，大神们指导一下吧  |
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