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复合型离子交换介质应用常见问题
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复合型离子交换介质使用问题 用的MMA Focurose HF介质蛋白洗不下来？ 复合型离子交换介质和常规的有啥区别？ 用MMC时2M氯化钠都没洗下来？ 用复合型的效果不好？ .... 面对这些问题我们如何解决呢？ 复合型离子交换介质应用特点 1.当目标分子在低盐环境中不稳定时可以尝试用复合型离子交换介质。 2.Ni介质的洗脱峰中含有咪唑，无需脱盐可直接进行复合型离子交换进一步纯化。 3.复合型离子交换在去除聚体时有良好的作用，比如去除抗体中的聚体，MMA Focurose HF在去除单抗中的聚体有良好的效果，去除抗体中的聚体时采用流穿模式具有更好的载量。 复合型弱阳离子交换介质 名称 MMC Focurose 6HF 基质 高刚性琼脂糖 粒径范围 45-165μm 平均粒径 90μm 介质类型 弱阳离子交换 离子载量 70-90umol H+/ml 介质 pH稳定性 2-14（短期）3-12（长期） 操作压力 ≤0.5MPa 最大流速 1000cm/h 化学稳定性 所有常用缓冲液、1.0M氢氧化钠、8M尿素、6M盐酸胍、70%乙醇 避免使用氧化剂、阳离子去污剂、阳离子缓冲液 贮存溶液 20%乙醇 贮存温度 4-30℃ 复合型强阴离子交换介质 名称 MMA Focurose 6HF 基质 高刚性琼脂糖 粒径范围 45-165μm 平均粒径 90μm 介质类型 强阴离子交换 离子载量 90-120umol Cl-/ml 介质 pH稳定性 2-14（短期）4-12（长期） 操作压力 ≤0.5MPa 流速 1000cm/h 化学稳定性 所有常用缓冲液、1.0M氢氧化钠、1.0M乙酸、8M尿素、6M盐酸胍、70%乙醇 避免使用氧化剂、阴离子去污剂 贮存溶液 20%乙醇 贮存温度 4-30℃ 复合型离子交换介质和常规离子交换介质的差异 从结构可知，复合型离子交换介质的识别基团中不仅有带点基团而且都含有苯环，苯环有一定的疏水作用力，所有复合型离子交换介质已离子交换作用为主，同时有一定的疏水作用力。 复合型离子交换介质洗脱方式 1.离子交换介质洗脱有三种方式：增强离子强度洗脱，改变pH洗脱，增强离子强度的同事改变pH三种方式。常规离子交换介质和复合型离子交换介质都可以用此三种方式洗脱。 2.复合型离子交换介质洗脱时比常规的离子交换介质需要的离子强度更高，当洗脱的离子强度为2M氯化钠时还未彻底洗脱，此时可以通过改变pH的方式进行洗脱。 3.复合型离子交换介质用增强离子强度同时改变pH的方式进行洗脱通常比单纯的增加离子强度的方式效果更好。 4.洗脱方式两类离子交换介质一致，可以等度洗脱（不需要精密的层析设备）和线性梯度洗脱*（精密的层析设备有利于分辨率的提高）。 生物制药合伙人 《生物制药合伙人：zpt_Partner》公众号！秉持分享传承生物制药相关技术，汇集生物制药相关的细分技术，网罗业界同仁的丰富经验心得，助力行业的发展，以疫苗，抗体，蛋白等生物制药，生物技术的核心技术分享传承为初衷，助力行业发展。欢迎您把此公众号分享给自己的同学，同事，朋友！ |
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