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[求助]
新手求助，离子交换柱纯化蛋白，目标蛋白和杂蛋白吸附很少甚至没有挂住 已有4人参与
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入门菜鸟，最近在纯化一个等电点8.5左右的蛋白。之前分别采用DEAE（缓冲液pH10）和CM（缓冲液pH7）进行纯化。 发现上样后蛋白质随throughout流出很多，阴离子交换柱洗脱时仅有少许蛋白洗出来，而阳离子交换柱甚至在洗脱时基本没有蛋白质（包括杂蛋白）。 我想是不是蛋白质的缓冲溶液离子强度太高的原因？ 是否可以用稀释的办法？稀释的比例大概是怎么样的？ 另听说可以在烧杯中放入填料进行简易的蛋白质吸附试验，有没有大神可以告知大概的步骤？ 问题可能问的蠢，请大家见谅！ 发自小木虫IOS客户端 |
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wx612725
木虫 (正式写手)
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