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xutao
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求助pcr
最近在做pcr,每次P出来的产物都很大,我要的是2k,p出来的都是4k!求各位分析一下原因!
[
Last edited by 350784478 on 2009-10-4 at 20:49
]
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第三军团
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2009-04-02 21:21:59
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anik
银虫
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专业: 蔬菜学与瓜果学
离子对PCR也有影响。。。。
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4楼
2009-04-03 16:46:21
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xutao
金虫
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性别: GG
专业: 生殖系统/围生医学/新生儿
谢谢你的回答,不知道除了换引物之外还有没有其他办法
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第三军团
3楼
2009-04-03 11:03:38
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sutao1979
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专业: 植物分类学
从头到尾看看是不是产物长度和你计算的有出入,或者你的模板是多拷贝都有可能,一般来说向你说的这种可能性不大
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会当凌绝顶,一览众山小
6楼
2009-04-03 16:57:20
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小驹8578
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你可以将你的引物3‘端的十个在你的模板里找一找,看看有没有可能有两个匹配位点,如果是,那么就很有可能引物匹配在了另一个位点,这样可能PCR出的是比你要的大的。或是你可以提高退火温度试试,如果有可能,可以做一个梯度PCR,一般提高退火温度可以提高引物特异性。
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7楼
2009-04-03 17:34:00
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