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your2007

至尊木虫 (著名写手)

[交流] 求α-葡萄糖苷酶等电点的测定方法或类似酶的等电点测定方法

如题,谢谢!除了等点聚焦电泳方法,还有没有其他方法可行。不一定要求十分精确。
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catfish338

酪蛋白等电点的测定
(1)取同样规格的试管7支,按下表精确地加入下列试剂:

试剂(ml)
管号

1
2
3
4
5
6
7

1.0mol/L 乙酸
1.6
0.8
0
0
0
0
0

0.1mol/L 乙酸
0
0
4
1
0
0
0

0.01mol/L 乙酸
0
0
0
0
2.5
1.25
0.62

H2O
2.4
3.2
0
3
1.5
2.75
3.38

溶液的pH
3.5
3.8
4.1
4.7
5.3
5.6
5.9


(2)充分摇匀,然后向以上各试管依次加入0.5%酪蛋白1ml,边加边摇,摇匀后静置5min,观察各管的混浊度。

(3)用-、+、++、+++等符号表示各管的混浊度。根据混浊度判断酪蛋白的等电点。最混浊的一管的pH值即为酪蛋白的等电点。



注意事项 缓冲液的pH值必须准确。
2楼2009-05-05 08:42:56
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