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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助：各位虫虫说说PCR方面的
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zhyyk10

金虫 (小有名气)

[交流] 求助：各位虫虫说说PCR方面的

我要扩一个800多bp的条带，第一次一扩就出来很清晰的目的条带，结果重复第二次第三次就没有条带了，连非特异性条带也没有，不知道这个怎么回事啊？想问问大家这是怎么回事？有没有好的方法啊？在这里先谢谢大家了
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相信自己！
1楼 2009-04-02 10:15:32
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yaoguizhe

铁虫 (初入文坛)
★
350784478(金币+1):谢谢提供
有可能是buffer不好使了 ，建议换一下
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2楼2009-04-02 10:41:33
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小猫三两只

金虫 (正式写手)
★
350784478(金币+1):谢谢
PCR扩增中经常会出现这种情况,同样的东西再做一次就可能什么也没有.

既然第一次都会有,那么说明试剂都不会有问题了,建议还用同样的东西扩一次,注意细节上的问题,比如加样时一定要保证都加进去,混合体系要混匀等.
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3楼2009-04-02 12:18:29
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xujiemeng

铜虫 (小有名气)
★
350784478(金币+1):谢了
这种情况我也遇到过,分子实验有时候很难重复的,建议你更换你的那一套东西,可能是其中的某个出问题了,祝你成功!
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4楼2009-04-02 12:19:01
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Gelonee

铜虫 (正式写手)
这种情况在我做毕业论文时也遇到过,分子克隆实验有时是很不容易重现的.
      希望下次再扩增时注意细节,尤其是在加样时一定要保证全加进去(如果体系不够,可以先多出几管的体积)总之,保证混合体系要均一稳定!!


       最后预祝实验马到成功 !!   
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5楼2009-04-02 16:52:23
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