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jing7561

新虫 (小有名气)

[求助] 引物设计已有2人参与

紧急求助,紧急求助。
在设计引物,我想请教一下各位老师,同学。我有三个基因,相似度高达99.5%,我要从中设计引物,我找了好久都没弄出来,三个基因中仅有几个碱基不一样,还是这种情况,这个基因的一个碱基和第二个一样,和第三个不一样,总之不是和第三个基因一样就是和第二个一样。实在把引物设计不出来了,紧急求助,谢谢您们。

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清平乐fy

新虫 (初入文坛)

把碱基不一样的放在引物的3’端,尽量靠近3端有不同碱基,同时PCR时不要用带有3到5’外切酶活性的聚合酶

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11楼2018-08-19 01:09:19
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我欲乘风归去

木虫 (正式写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-08-12 09:12:26
从ATG上游的50-100bp5UTR和终止密码子下游50-100bp3-utr设计引物试试,UTR应该不会太保守,扩出来连到载体上再设计基因引物。
2楼2018-08-10 22:42:23
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as180156

新虫 (小有名气)

你把碱基不一样的地方直接作为引物!

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3楼2018-08-11 01:48:39
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kaoyanjiu

新虫 (小有名气)

基因长吗,几百bp的话直接合成吧,还不贵。

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4楼2018-08-11 12:55:57
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