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shenye.judy

木虫 (正式写手)

[交流] 求助miRNA的qRT-PCR方法!

本人需要做miRNA的实时定量PCR,用SYBR方法。mRNA的实时定量PCR实验室有人做过。可是miRNA的不知道怎么做,有没有做过的虫友指教一下!!!!
比如,提取的总RNA是否也要用DNA酶处理?这样会不会对miRNA有损失?
还有一些需要注意的事项,是普通实时定量PCR实验没有的?
多谢!!!
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★ ★ ★
shenye.judy(金币+5,VIP+0):多谢!!有推荐的试剂盒吗?不用试剂盒可以吗? 4-2 17:24
不需要DNAase
小通量研究最适合用茎环引物法
大同量研究比较适合用加尾法
买个试剂盒就知道了~~
当然也有文献报道如何用茎环引物做miR的qPCR
2楼2009-04-01 21:55:11
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


shenye.judy(金币+1,VIP+0):谢谢! 4-2 18:06
已经回复站内信给你了~~
如果你已经有了mRNA的qPCR试剂盒,那就不用再买了,假如你使用的是茎环引物法
3楼2009-04-02 17:54:02
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