应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » Ni-NTA纯化后 保存 蛋白变性？
51/1返回列表
查看: 962  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

hqqwdm

新虫 (正式写手)

[交流] Ni-NTA纯化后 保存 蛋白变性？

我用Ni-NTA纯化目的蛋白，用250 mM 咪唑，300 mM NaCl, 50 mM 磷酸钠溶液洗脱回收目的蛋白。
将目的蛋白 保存在上述的elution buffer里，并放-20℃冰箱短暂保存；过了两天之后，发现溶液底部有较多的絮状物，请问是蛋白变性了吗？
目标蛋白的PI 约为7.25左右，elution buffer的pH值为8.0。

另外，纯化后的蛋白是否应该立即更换buffer，不能按照上述操作进行？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2018-08-06 21:16:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hqqwdm

新虫 (正式写手)
自己顶，希望牛人解答
赞一下 回复此楼
2楼2018-08-07 09:28:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

banmaoyao

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我感觉可能是你的蛋白变性了。我们的样品保存在500mM咪唑中，4度保存问题不大。但是冻起来就会降解，目前还在寻找合适的稳定剂
赞一下 回复此楼
3楼2018-08-08 11:06:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hc-material

专家顾问 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
洗脱后变更缓冲液，或者可尝试加入20%的甘油，试试
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2018-08-10 13:10:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LingniuY

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也遇到过这样的情况，后面加了10%的甘油就没有沉淀了
赞一下 回复此楼
5楼2018-08-29 20:30:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hqqwdm 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 2026博士还有哪些学校有名额 +4 小王求读研 2026-05-15 5/250 2026-05-16 07:09 by lilibo1987
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 l7k6xnh0yc 2026-05-14 5/250 2026-05-16 04:33 by k37jurhrau
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 l7k6xnh0yc 2026-05-14 5/250 2026-05-16 04:29 by k37jurhrau
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 cjf4bx70cj 2026-05-14 5/250 2026-05-16 04:24 by k37jurhrau
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 l7k6xnh0yc 2026-05-14 3/150 2026-05-16 01:49 by k37jurhrau
[文学芳草园] 裁员滚滚，退居二线 +3 J_wei 2026-05-10 3/150 2026-05-15 22:52 by molecula
[论文投稿] 有带发论文的吗 +4 山楂之术 2026-05-09 4/200 2026-05-15 15:40 by 妹子不好惹
[文学芳草园] 风把牡丹吹跑了 +5 myrtle 2026-05-12 9/450 2026-05-15 15:27 by myrtle
[基金申请] 精华III:  评审感受-评审感受-评审感受 +14 ferrarichen 2026-05-11 18/900 2026-05-15 11:12 by cmhchen
[基金申请] 这年头没有找到涵评专家，还有中面上的可能吗 +9 dd921ww 2026-05-12 10/500 2026-05-15 10:41 by muyiliuhui
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 l7k6xnh0yc 2026-05-14 3/150 2026-05-15 09:23 by onwj4wpxp2
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 cjf4bx70cj 2026-05-14 4/200 2026-05-15 09:03 by gagyerk94e
[教师之家] 教学课件你会给同学吗 +8 硕士研究生吗 2026-05-13 8/400 2026-05-14 22:23 by 常规沥青
[考博] 26应届毕业生考博求助 +3 wo一定上岸 2026-05-13 3/150 2026-05-14 21:47 by 明海天涯
[高分子] 本人最近太闲了，谁有问题可以提，每天会统一回复 +8 一切都是空工 2026-05-12 19/950 2026-05-14 20:03 by 一切都是空工
[考博] 申博自荐 +4 食品的橙子 2026-05-09 6/300 2026-05-14 16:05 by great1919
[考博] 材料类只有一篇综述能申博么 +4 乐逍遥谷 2026-05-13 4/200 2026-05-14 12:05 by zhyzzh
[基金申请] 请问大佬b0816评完了吗 +3 市民华南虎 2026-05-12 7/350 2026-05-14 07:41 by 市民华南虎
[论文投稿] 求助大佬sci投稿哪个好中 +3 江沅188 2026-05-12 4/200 2026-05-13 14:35 by 江沅188
[考博] 现在不知道怎么办，感觉很痛苦 +4 qweww 2026-05-11 5/250 2026-05-11 20:23 by Oversize
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭