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Ni-NTA纯化后 保存 蛋白变性?
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我用Ni-NTA纯化目的蛋白,用250 mM 咪唑,300 mM NaCl, 50 mM 磷酸钠溶液洗脱回收目的蛋白。 将目的蛋白 保存在上述的elution buffer里,并放-20℃冰箱短暂保存;过了两天之后,发现溶液底部有较多的絮状物,请问是蛋白变性了吗? 目标蛋白的PI 约为7.25左右,elution buffer的pH值为8.0。 另外,纯化后的蛋白是否应该立即更换buffer,不能按照上述操作进行? |
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