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[求助]
求助！！急！！根癌农杆菌介导的丝状真菌基因敲除 已有1人参与
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| 求助各位大神，本人目前在做意大利青霉的基因敲除，使用根癌农杆菌介导真菌转化的方法，共培养后转抗性板筛选可得到单菌落，进行二次抗性筛选，单菌落可生长。保存真菌转化子，提取DNA，扩增不出抗性基因，其中敲除载体可扩增出抗性基因。对保存的转化子再次进行抗性筛选验证，发现部分转化子丧失抗性，部分仍有抗性的转化子也不能扩出抗性基因。目前已经做了近十次农杆菌介导转化实验，换过一次敲除载体，问题仍然没有解决。向各位大神求助原因~谢谢！ |
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2楼2018-08-21 16:36:17
3楼2018-08-21 17:19:57
Citifri
新虫 (初入文坛)
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- 专业: 微生物生理与生物化学
4楼2019-07-29 16:43:46