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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 求助！！急！！根癌农杆菌介导的丝状真菌基因敲除
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wahahahxx

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助！！急！！根癌农杆菌介导的丝状真菌基因敲除 已有1人参与

求助各位大神，本人目前在做意大利青霉的基因敲除，使用根癌农杆菌介导真菌转化的方法，共培养后转抗性板筛选可得到单菌落，进行二次抗性筛选，单菌落可生长。保存真菌转化子，提取DNA，扩增不出抗性基因，其中敲除载体可扩增出抗性基因。对保存的转化子再次进行抗性筛选验证，发现部分转化子丧失抗性，部分仍有抗性的转化子也不能扩出抗性基因。目前已经做了近十次农杆菌介导转化实验，换过一次敲除载体，问题仍然没有解决。向各位大神求助原因~谢谢！
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1楼 2018-08-06 20:39:57
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peach9495

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
2楼2018-08-21 16:36:17
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)

【答案】应助回帖

意大利青霉是生产什么活性物质的呢
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3楼2018-08-21 17:19:57
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Citifri

新虫 (初入文坛)
你的原始菌是不是也能在抗性上长啊？或许试着增加抗性浓度

发自小木虫IOS客户端
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4楼2019-07-29 16:43:46
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