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邙山守陵人

新虫 (小有名气)

[交流] 蛋白有表达,纯化不出来 已有2人参与

目的蛋白在全菌中能够正常表达,但是全菌破碎后,目的蛋白在电泳条带上会下移,并且使用镍柱纯化不出来(怀疑是His标签断了)。并不是每一次都会出现这种情况(培养条件相同),大部分正常达表,也能正常纯化出来。为什么会出现这种情况呀~~~~~很纠结~~~~~要被逼疯了,根本找不到原因。
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balalalabala

新虫 (小有名气)


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做个WB可以检测HIS标签是否降解,纯化的时候加点蛋白酶抑制剂看行不行
2楼2018-08-03 12:47:38
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握不住的沙子

金虫 (小有名气)

行业新手


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主,你的问题解决了吗 ,我现在遇到了和你相似的问题。我现在正常纯化都很难做出来。上样前的检测到蛋白,上样后找不到目标峰,没有条带。
3楼2019-07-09 23:09:27
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