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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 蛋白有表达，纯化不出来
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邙山守陵人

新虫 (小有名气)

[交流] 蛋白有表达，纯化不出来 已有2人参与

目的蛋白在全菌中能够正常表达，但是全菌破碎后，目的蛋白在电泳条带上会下移，并且使用镍柱纯化不出来（怀疑是His标签断了）。并不是每一次都会出现这种情况（培养条件相同），大部分正常达表，也能正常纯化出来。为什么会出现这种情况呀~~~~~很纠结~~~~~要被逼疯了，根本找不到原因。
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1楼 2018-08-03 10:04:51
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balalalabala

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
做个WB可以检测HIS标签是否降解，纯化的时候加点蛋白酶抑制剂看行不行
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2楼2018-08-03 12:47:38
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握不住的沙子

金虫 (小有名气)

行业新手
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
楼主，你的问题解决了吗 ，我现在遇到了和你相似的问题。我现在正常纯化都很难做出来。上样前的检测到蛋白，上样后找不到目标峰，没有条带。
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3楼2019-07-09 23:09:27
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