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wcyzoe

银虫 (初入文坛)

[交流] 琼脂糖凝胶上条带成弥散状

RAPD分子标记,琼脂糖凝胶上条带成弥散状这是怎么回事?请求大家帮助,不胜感激……
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biocore

核酸降解了。
或者是引物有问题,什么都没有P出来。
2楼2009-04-01 14:55:21
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wcyzoe

银虫 (初入文坛)

非常感谢!您觉得应该怎样处理比较妥当呢??
3楼2009-04-02 10:25:14
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anik

银虫 (正式写手)

很大程度上是引物的问题,重新设计引物。。。。
4楼2009-04-02 18:46:52
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

marker有没有弥散呢?
如果连marker的都弥散,考虑重新配TBE
5楼2009-04-02 19:36:47
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wcyzoe

银虫 (初入文坛)

marker没有弥散
6楼2009-04-09 10:26:49
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amilie030312

金虫 (正式写手)

Marker没有问题说明电泳跑的没有问题,那一定是PCR造成的,可能是引物不合适,则需要重新设计引物,也可能是退火温度没找对。如果是最下方能看到有很粗的条带然后上面托了很严重的弥散带,那是模板浓度太大了,稀释模板重新跑就可以了。
7楼2009-04-09 13:12:36
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gaocb1983

新虫 (初入文坛)

原因很多, 估计还是PCR没有扩好,也有可能是扩出来的产物降解了 ,建议再扩一次看看
8楼2009-04-09 13:30:08
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aga0110125

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by anik at 2009-4-2 18:46:
很大程度上是引物的问题,重新设计引物。。。。

4楼也太搞笑了,RAPD是随机引物扩增,怎么设计引物呀,做实验做糊涂了吧
~\(≧▽≦)/~   RAPD第一步就是筛选引物,你要重新做吗?
9楼2009-04-10 15:50:09
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wcyzoe

银虫 (初入文坛)

谢谢各位 有谁在做rapd实验吗?可以过来请教一下吗
10楼2009-04-13 09:14:51
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