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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 琼脂糖凝胶上条带成弥散状
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wcyzoe

银虫 (初入文坛)

[交流] 琼脂糖凝胶上条带成弥散状

RAPD分子标记，琼脂糖凝胶上条带成弥散状这是怎么回事？请求大家帮助，不胜感激……
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1楼 2009-04-01 13:38:01
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biocore

核酸降解了。
或者是引物有问题，什么都没有P出来。
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2楼2009-04-01 14:55:21
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wcyzoe

银虫 (初入文坛)
非常感谢！您觉得应该怎样处理比较妥当呢？？
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3楼2009-04-02 10:25:14
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anik

银虫 (正式写手)
很大程度上是引物的问题，重新设计引物。。。。
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4楼2009-04-02 18:46:52
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
marker有没有弥散呢？
如果连marker的都弥散，考虑重新配TBE
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5楼2009-04-02 19:36:47
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wcyzoe

银虫 (初入文坛)
marker没有弥散
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6楼2009-04-09 10:26:49
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amilie030312

金虫 (正式写手)
Marker没有问题说明电泳跑的没有问题，那一定是PCR造成的，可能是引物不合适，则需要重新设计引物，也可能是退火温度没找对。如果是最下方能看到有很粗的条带然后上面托了很严重的弥散带，那是模板浓度太大了，稀释模板重新跑就可以了。
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7楼2009-04-09 13:12:36
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gaocb1983

新虫 (初入文坛)
原因很多， 估计还是PCR没有扩好，也有可能是扩出来的产物降解了 ，建议再扩一次看看
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8楼2009-04-09 13:30:08
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aga0110125

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by anik at 2009-4-2 18:46:
很大程度上是引物的问题，重新设计引物。。。。

4楼也太搞笑了，RAPD是随机引物扩增，怎么设计引物呀，做实验做糊涂了吧
~\(≧▽≦)/~   RAPD第一步就是筛选引物，你要重新做吗？
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9楼2009-04-10 15:50:09
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wcyzoe

银虫 (初入文坛)
谢谢各位 有谁在做rapd实验吗？可以过来请教一下吗
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10楼2009-04-13 09:14:51
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