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求教如何做ATP酶的双倒数曲线?
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| 各位大神,我最近在研究一个蛋白的ATP酶活性,利用孔雀绿磷酸盐试剂盒来检测蛋白与ATP水解一小时后所产生的磷酸的OD620的值。由于ATP本身也会与孔雀绿产生绿色混合物,有很高的OD620读数,所以我会用酶反应后的OD620值减去ATP本身的OD620值作为磷酸盐的产量。我利用这种办法,会检测5种不同ATP浓度下蛋白在1h中水解ATP的平均速率。但是,利用这种方法获得的酶反应平均速率的倒数,与ATP底物浓度的倒数没有办法形成一条直线,无法获得双倒数曲线。请教各位大神指导一下应该如何做双倒数曲线,谢谢。 |
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