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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 求教如何做ATP酶的双倒数曲线？
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小懒猫猫121

新虫 (初入文坛)

[求助] 求教如何做ATP酶的双倒数曲线？

各位大神，我最近在研究一个蛋白的ATP酶活性，利用孔雀绿磷酸盐试剂盒来检测蛋白与ATP水解一小时后所产生的磷酸的OD620的值。由于ATP本身也会与孔雀绿产生绿色混合物，有很高的OD620读数，所以我会用酶反应后的OD620值减去ATP本身的OD620值作为磷酸盐的产量。我利用这种办法，会检测5种不同ATP浓度下蛋白在1h中水解ATP的平均速率。但是，利用这种方法获得的酶反应平均速率的倒数，与ATP底物浓度的倒数没有办法形成一条直线，无法获得双倒数曲线。请教各位大神指导一下应该如何做双倒数曲线，谢谢。
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1楼 2018-07-30 09:39:17
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小懒猫猫121

新虫 (初入文坛)
顶上去，期待解答

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2楼2018-08-07 09:32:16
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晓来雨过

新虫 (小有名气)
你好，我最近也要做ATP酶活性检测，能把你的试剂盒货号和厂家发给我么
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3楼2018-09-19 10:54:24
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coke1109

新虫 (小有名气)
请问楼主是否解决空白组（ATP+H2O+assay buffer），在OD 620nm下，就有较高的数值的？谢谢！
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4楼2019-06-21 14:27:57
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