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青萍之沫

新虫 (职业作家)

[交流] 连接不上已有5人参与

我用pColdI载体双酶切,酶是sacI和xbaI,然后与酶切后的外源片段连接,能够长斑,但是菌液pcr鉴定不出来,这是为什么,已经做了好久了。

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青萍之沫

新虫 (职业作家)

引用回帖:
11楼: Originally posted by aa342523 at 2018-08-07 14:05:40
一般是酶切原因,酶切对水的要求很高,试试买其他公司的酶切去离子无核酸水

用灭菌双蒸水不行吗

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12楼2018-08-07 14:29:29
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kangaroo0513

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
要不要丢给我们连呀~~
2楼2018-07-30 12:31:55
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木元雨

木虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我以前也遇到过这种情况,虽然用的不是你这种载体。你可以把所有的实验步骤都仔细看一遍,从培养基配制,筛选抗性,酶切后产物的回收等一条条的排除问题

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3楼2018-07-30 12:44:45
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青萍之沫

新虫 (职业作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 木元雨 at 2018-07-30 12:44:45
我以前也遇到过这种情况,虽然用的不是你这种载体。你可以把所有的实验步骤都仔细看一遍,从培养基配制,筛选抗性,酶切后产物的回收等一条条的排除问题

那你是怎木解决的

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4楼2018-07-30 15:08:15
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