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cocktail探针法测定CYP450酶活性，发现底物含量无变化
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使用cocktail探针法测定五种底物（非那西丁，奥美拉唑，氢溴酸右美沙芬，氯唑沙宗和睾酮）含量变化，测定后发现五种底物基本无含量变化。 反应流程为肝微粒体+混合探针底物+缓冲溶液+抑制剂或诱导剂反应系在37℃恒温水浴中预孵育5min后加入NADPH再生系统启动反应，孵育30min；总体积200 μl，最终反应体系中有机溶剂的含量不超过1%。 体系在37℃恒温水浴中孵育30min，冷却至室温后加入冰冷的含内标的乙腈200μl终止反应，涡旋混匀1min，4℃，16000g离心20 min后，取上清液进样分析。 其中NAPDH再生系统内还有（NADPH10mM，G-6-P50mM，G-6-PDH 10U/ml，MgCl2 30mM）。 老板催无反应的原因，催结果，求各位dalao帮忙。 |
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2楼2018-08-02 14:39:21