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shnmyx铜虫 (正式写手)
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cas9基因编辑系统在疟原虫中的应用
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求哪位大神知道在疟原虫中进行基因编辑时要使用positive (pyrimethamine, Pyr) and negative (5-fluorocytosine, 5FC)selection原理是什么？以下是文献中的原句： Drug resistant genes encoding human dihydrofolate reductase (hDHFR) and a yeast bifunctionalprotein (yFCU), with cytosine deaminase (CD) and uridyl phosphoribosyl transferase (UPRT) activities in the plasmid, allowed sequential positive (pyrimethamine, Pyr) and negative (5-fluorocytosine, 5FC)selections and generation of transgenic parasites free of the episomal plasmid after genetic modification. 我的理解是： positive (pyrimethamine, Pyr) selection：如果将疟原虫放在Pyr中培养，活着的疟原虫就具有抗Pyr性，也就证明这两个基因具有抗Pyr性，进一步说明疟原虫携带基因hDHFR和yFCU的。Pyr（乙胺嘧啶）是治疗疟疾的药物之一，它能够抑制疟原虫的二氢叶酸还原酶，从而干扰疟原虫体内叶酸的正常代射。此外，乙胺嘧啶也能抑制疟原虫在蚊体内的发育，故可阻断传播。临床上，乙胺嘧啶用于预防疟疾和抗复发治疗。 negative (5-fluorocytosine, 5FC)：如果将疟原虫放在5FC中培养，活着的疟原虫就具有抗5FC性，抗这个就说明不携带基因hDHFR和yFCU。 5FC（5-氟胞嘧啶）作为抗疟病因性预防的首选药，在中国药典①有收载，因其能抑制疟原虫的二氢叶酸还原酶，阻碍核酸的合成，有抑制恶性疟和间日疟的原发性红细胞外期作用;能阻止疟原虫在蚊体内的孢子增殖，故能控制其传播;还对红细胞内期的未成熟裂殖体有抑制作用，可用于控制耐氯喹的恶性疟症状发作。 不知道我理解的对不对，求专业人士指点，在此谢过啦！抱拳！ |
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