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铜虫 (正式写手)

[求助] cas9基因编辑系统在疟原虫中的应用

求哪位大神知道在疟原虫中进行基因编辑时要使用positive (pyrimethamine, Pyr) and negative (5-fluorocytosine, 5FC)selection原理是什么?以下是文献中的原句:
Drug resistant genes encoding human dihydrofolate reductase (hDHFR) and a yeast bifunctionalprotein (yFCU), with cytosine deaminase (CD) and uridyl phosphoribosyl transferase (UPRT) activities in the plasmid, allowed sequential positive (pyrimethamine, Pyr) and negative (5-fluorocytosine, 5FC)selections and generation of transgenic parasites free of the episomal plasmid after genetic modification.
我的理解是:
positive (pyrimethamine, Pyr) selection:如果将疟原虫放在Pyr中培养,活着的疟原虫就具有抗Pyr性,也就证明这两个基因具有抗Pyr性,进一步说明疟原虫携带基因hDHFR和yFCU的。Pyr(乙胺嘧啶)是治疗疟疾的药物之一,它能够抑制疟原虫的二氢叶酸还原酶,从而干扰疟原虫体内叶酸的正常代射。此外,乙胺嘧啶也能抑制疟原虫在蚊体内的发育,故可阻断传播。临床上,乙胺嘧啶用于预防疟疾和抗复发治疗。
negative (5-fluorocytosine, 5FC):如果将疟原虫放在5FC中培养,活着的疟原虫就具有抗5FC性,抗这个就说明不携带基因hDHFR和yFCU。
5FC(5-氟胞嘧啶)作为抗疟病因性预防的首选药,在中国药典①有收载,因其能抑制疟原虫的二氢叶酸还原酶,阻碍核酸的合成,有抑制恶性疟和间日疟的原发性红细胞外期作用;能阻止疟原虫在蚊体内的孢子增殖,故能控制其传播;还对红细胞内期的未成熟裂殖体有抑制作用,可用于控制耐氯喹的恶性疟症状发作。
不知道我理解的对不对,求专业人士指点,在此谢过啦!抱拳!
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