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荧光探针在荧光定量PCR技术中的应用
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今天介绍一下荧光探针在荧光定量PCR中的应用,相信大家都对荧光定量PCR或多或少了解一些,在这里,如果你知道了,不妨让我们重新来学习一下吧。 首先我们先来了解一下什么是荧光定量PCR,简单的说,它是一种实时监控核酸扩增的技术,也就是我们在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号的变化对PCR过程进行实时监控,以此实现对初始模板的定量分析。 荧光定量PCR本身就是产物的放大反应,它是在普通PCR的基础上加上了荧光染料或者探针,在扩增过程中,荧光信号就会随着PCR产物的增加而增强,通过对荧光强度的检测,从而到达对初始模板量进行定量检测。 实时荧光定量 PCR 的化学原理包括荧光染料和荧光探针两种:1、荧光染料的作用机制主要为染料能够与双链DNA小沟结合,当PCR扩增时,随着目的基因的增加,结合的荧光染料也逐渐增多,通过对荧光信号的收据对初始模板进行检测,虽然荧光染料经济方便,但也有其很大的缺点,只要是双链DNA都能结合发光,特异性不强,这也是不常作为微量模板检测的原因,例如病原体的检测。2、探针类是除了引物外另外设置的一个探针,在它的两端分别带上发光基团和淬灭基团,这个时候,两个平衡不发光,但当DNA通过引物被合成的时候,探针被折断,释放出发光基团和淬灭基团,两个距离较远,发光基团产生荧光,被机器收集,从而达到检测模板量。 一道生物科技在探针修饰方面有着最高端的技术平台和优秀的团队,探针修饰类型上百种,应用范围也很广,其中双标探针修饰类型居多,如果你还在为探针设计和修饰烦恼,来一道,总有一款适合你。 |
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