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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 酶连反应体系
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芥末本绿

金虫 (正式写手)

[交流] 酶连反应体系 已有2人参与

目的片段900bp，载体8000bp，双酶切回收后跑胶，目的片段浓度有点低，大概10ng/ul，质粒浓度高，大概50ng/ul，10ul的酶连体系，分别要加多少比较合适

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1楼 2018-07-25 09:17:16
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渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
按照你用的酶的连接体系要求来
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2楼2018-07-25 09:26:33
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xmcsxq0606

新虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
渊博震天: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-07-27 09:44:52
片段:载体摩尔比=1:1-5:1 22度连长一点就可以

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3楼2018-07-26 11:47:56
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芥末本绿

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xmcsxq0606 at 2018-07-26 11:47:56
片段:载体摩尔比=1:1-5:1 22度连长一点就可以

我做了7：1的比例，22度过夜连时间会不会太长了
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4楼2018-07-26 16:44:47
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xmcsxq0606

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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4楼: Originally posted by 芥末本绿 at 2018-07-26 16:44:47
我做了7：1的比例，22度过夜连时间会不会太长了...

不会的，这个跟时间太长没关系，效果一样

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5楼2018-07-26 23:14:46
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xmcsxq0606

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
4楼: Originally posted by 芥末本绿 at 2018-07-26 16:44:47
我做了7：1的比例，22度过夜连时间会不会太长了...

22度连个半个小时以上，再4度过夜连，不用22度过夜，第二天转化大肠

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6楼2018-07-26 23:18:58
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芥末本绿

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by xmcsxq0606 at 2018-07-26 23:18:58
22度连个半个小时以上，再4度过夜连，不用22度过夜，第二天转化大肠
...

感觉我们为了保险，什么温度都是过夜，主要是放在pcr仪里面也不是很操心，哈哈

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7楼2018-07-27 06:44:24
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