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铁虫 (小有名气)

[求助] 如何用DMSO溶解抑制剂

本人新手,最近要做细胞试验,需要用到抑制剂,但是现在遇到了一些问题,请各位老师或者大神指教。

因为本抑制剂说明书标明需要用DMSO溶解,上网查了下,0.1%的DMSO对细胞没有显著影响。现在手里有10mg的NPS2143抑制剂,说明书标明:稀释成5mM需要DMSO4.8909ml。现在做试验需要抑制剂浓度5mM,请问完全配制需要多少DMSO,又需要多少培养液?

下面是小弟算的,但是总觉得有点问题:

5mM抑制剂需要4.8909ml DMSO;

因为培养液里面的DMSO浓度需为0.1%,所以体积DMSO:培养液=1:1000;

先将抑制剂浓度扩大1000倍,即为5000mM的浓度,DMSO即为4.8909ul;

根据DMSO:培养液=1:1000,培养液需要4.8909ml,也就是说,先用DMSO4.8909ul溶解抑制剂,再将DMSO溶解后的溶液加入到4.8909ml的培养基中。最终浓度即为5mM

但是有个问题,小弟做的是6孔板,1孔需要2ml的培养液,如果按照这样算的话,10mg的抑制剂小弟只能加2个孔,这太不可思议了吧。小弟到底算的是对还是错啊,10mg抑制剂好几千呢,一个处理至少得6个孔吧,总觉得自己算错了。
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铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 原来,是这样 at 2018-07-21 16:30:29
你看错了吧,一个抑制剂需要5mM的浓度去做实验?如果是,你算的就没错,想要做下去可以换96孔板,100ul体系可以多做一些孔。

好的,谢谢啦
3楼2018-07-22 09:20:55
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原来,是这样

金虫 (小有名气)

你看错了吧,一个抑制剂需要5mM的浓度去做实验?如果是,你算的就没错,想要做下去可以换96孔板,100ul体系可以多做一些孔。

发自小木虫Android客户端
2楼2018-07-21 16:30:29
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铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 原来,是这样 at 2018-07-21 16:30:29
你看错了吧,一个抑制剂需要5mM的浓度去做实验?如果是,你算的就没错,想要做下去可以换96孔板,100ul体系可以多做一些孔。

做的是DFMO抑制剂,一直细胞内多胺的合成,刚刚又看了下,确实是5mM的浓度
4楼2018-07-22 09:28:31
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