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qingqingcao288

木虫 (小有名气)

[交流] 求助,大肠杆菌BL21(DE3)转化问题

如题,我用的是热激转化,上学期还挺正常的,但是本学期从开学已经转化十几次了,结果或者平板上不长,或者转化出来发酵没有酶活,用以前的质粒和新做的质粒也不行,猜想是感受态的问题,但是借别人的感受态也是这样,郁闷啊!一个多月了……烦请各位大侠帮我分析分析噢。
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qingqingcao288

木虫 (小有名气)

补充,氨苄也是新配过的。
2楼2009-03-31 10:57:10
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mofatuzi

新虫 (小有名气)

培养基对不对?转化条件对不对?抗生素浓度对否?
3楼2009-03-31 13:42:48
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wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户

★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢,欢迎常来生物版~ 3-31 15:04
菌不对了吧,重新取以前保存的菌种活化,制感受态,问题应该能解决
金币是赌出来的
4楼2009-03-31 13:43:38
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qingqingcao288

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by mofatuzi at 2009-3-31 13:42:
培养基对不对?转化条件对不对?抗生素浓度对否?

对的呀!就是LB,热激转化,抗生素新配的。
5楼2009-03-31 17:00:07
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qingqingcao288

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by wjswj at 2009-3-31 13:43:
菌不对了吧,重新取以前保存的菌种活化,制感受态,问题应该能解决

如果是菌不对,那用其他实验室的也做不出来,就不是了吧。
6楼2009-03-31 17:01:41
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Charlie1331

金虫 (正式写手)

恩。LZ的问题很特殊嘛……碰巧我们实验室的一个童鞋也是几乎一模一样的问题耶……等她做出来我告诉你怎么解决哦……
7楼2009-03-31 18:43:29
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qingqingcao288

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by Charlie1331 at 2009-3-31 18:43:
恩。LZ的问题很特殊嘛……碰巧我们实验室的一个童鞋也是几乎一模一样的问题耶……等她做出来我告诉你怎么解决哦……

切
8楼2009-03-31 19:24:32
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w.king124

金虫 (正式写手)


奇观了,目的基因变异了?
要不就重新来一遍吧,找原因太费时了
9楼2009-03-31 20:51:37
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)

质粒搞错了吧
10楼2010-03-23 00:55:17
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