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紫外分光光度计原理 已有1人参与
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求助:UV图谱中波长对应的吸收值是如何得出的，计算原理是什么？ @wyy080214 @klicking @学术巨星 @鸭绿江畔 @superyeast 发自小木虫Android客户端 |
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【答案】应助回帖
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朗伯一比尔定律(Lambert-Beer law)是分光光度法的基本定律，是描述物质对某一波长光吸收的强弱与吸光物质的浓度及其液层厚度间的关系; 适用于所有的电磁辐射和所有的吸光物质，包括气体、固体、液体、分子、原子和离子。比尔-朗伯定律是吸光光度法、比色分析法和光电比色法的定量基础。光被吸收的量正比于光程中产生光吸收的分子数目 。 Beer-Lambert定理 T = I / Io = 10^( - epsilon × c × L) T为透过率，I 为透过光强，Io 为入射光强，epsilon为样品在吸收波长下的消光系数，c为样品的物质的量浓度，L为样品的吸收光程。 对于溶液样品而言，更常用的是用吸收强度（Abs）来表示，吸收强度和透过率的换算关系是： Abs = - lg(T) = - lg( I / Io) = epsilon × c × L 公式就是A=ECL，A是吸光度值，E摩尔吸光系数 ，C为待测液浓度，L为液层厚度 朗伯定律是说明光的吸收与吸收层厚度成正比，比耳定律说明光的吸收与溶液浓度成正比； 物理意义是当一束平行单色光垂直通过某一均匀非散射的吸光物质时,与其吸光度A与吸光物质的浓度c及吸收层厚度b成正比. 应用前提 (1) 入射光为平行单色光且垂直照射. (2) 吸光物质为均匀非散射体系. (3) 吸光质点之间无相互作用. (4)辐射与物质之间的作用仅限于光吸收,无荧光和光化学现象发生. (5)适用范围:吸光度在0.2~0.8之间 导致偏离朗伯-比尔定律的原因很多，但基本上可分为物理和化学两个方面。物理方面主要是入射光的单色性不纯所造成的;化学方面主要是由于溶液本身化学变化造成的。 1单色光不纯引起的偏离； 2 溶液性质引起的偏离；3溶质和溶剂的性质；4介质不均匀性；5 溶质的变化 化学因素影响有。解离、缔合、生成络合物或溶剂化等会对比尔定律产生偏离。 |
2楼2018-07-19 13:01:46