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韵,式

新虫 (小有名气)

[交流] 关于T7E1酶切鉴定konckout突变体请教

请问大神们,我最近有三个knockout 突变体需要用T7E1酶切鉴定,我变性是程序,是把加了产物和buffer 的提议放在装有开水的烧杯中,等待移动降至室温,再放在pcr仪中37度孵育30分钟,可是跑2%的电泳,没有阳性结果,这是我实验方法不对吗?在做这个实验之前,我已经做了WB进行定性判断,显示我有敲低,请问我这是什么问题?

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fjtony163

版主 (文坛精英)

米米

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

你的阳性对照呢
2楼2018-07-18 00:24:29
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linhaobua

禁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

3楼2018-07-20 12:52:03
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一步一步往前

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问是neb的酶吗

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4楼2018-07-28 10:39:57
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韵,式

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 一步一步往前 at 2018-07-28 10:39:57
请问是neb的酶吗

不是,是国产的,南京的一个公司

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5楼2018-07-30 22:18:51
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一步一步往前

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这个实验现在做出来了吗?我一直切不出来

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6楼2018-07-30 22:36:40
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gzbjzjchen

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
切不开还是什么情况?

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7楼2018-07-31 08:13:36
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韵,式

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 一步一步往前 at 2018-07-30 22:36:40
这个实验现在做出来了吗?我一直切不出来

你用的是neb的酶?

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8楼2018-07-31 08:47:01
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韵,式

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 一步一步往前 at 2018-07-30 22:36:40
这个实验现在做出来了吗?我一直切不出来

我也切不出来,买了T7E1的也不行

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9楼2018-10-14 21:07:51
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韵,式

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by gzbjzjchen at 2018-07-31 08:13:36
切不开还是什么情况?

就只有一条带,而且很弱

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10楼2018-10-14 21:08:20
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