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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于T7E1酶切鉴定konckout突变体请教
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韵，式

新虫 (小有名气)

[交流] 关于T7E1酶切鉴定konckout突变体请教

请问大神们，我最近有三个knockout 突变体需要用T7E1酶切鉴定，我变性是程序，是把加了产物和buffer 的提议放在装有开水的烧杯中，等待移动降至室温，再放在pcr仪中37度孵育30分钟，可是跑2%的电泳，没有阳性结果，这是我实验方法不对吗？在做这个实验之前，我已经做了WB进行定性判断，显示我有敲低，请问我这是什么问题？

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1楼 2018-07-17 23:21:05
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fjtony163

版主 (文坛精英)

米米

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主
你的阳性对照呢
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2楼2018-07-18 00:24:29
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linhaobua

禁虫 (小有名气)
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3楼2018-07-20 12:52:03
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一步一步往前

新虫 (初入文坛)
★
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请问是neb的酶吗

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4楼2018-07-28 10:39:57
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韵，式

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 一步一步往前 at 2018-07-28 10:39:57
请问是neb的酶吗

不是，是国产的，南京的一个公司

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5楼2018-07-30 22:18:51
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一步一步往前

新虫 (初入文坛)
★
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这个实验现在做出来了吗？我一直切不出来

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6楼2018-07-30 22:36:40
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gzbjzjchen

铜虫 (小有名气)
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切不开还是什么情况?

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7楼2018-07-31 08:13:36
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韵，式

新虫 (小有名气)
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6楼: Originally posted by 一步一步往前 at 2018-07-30 22:36:40
这个实验现在做出来了吗？我一直切不出来

你用的是neb的酶？

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8楼2018-07-31 08:47:01
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韵，式

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 一步一步往前 at 2018-07-30 22:36:40
这个实验现在做出来了吗？我一直切不出来

我也切不出来，买了T7E1的也不行

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9楼2018-10-14 21:07:51
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韵，式

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by gzbjzjchen at 2018-07-31 08:13:36
切不开还是什么情况?

就只有一条带，而且很弱

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10楼2018-10-14 21:08:20
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