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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 有关16S rDNA菌种鉴定的问题
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cxc_1981

银虫 (小有名气)

[交流] 有关16S rDNA菌种鉴定的问题

我要做16S rDNA菌种鉴定，请问做的时候需要斜面就可以了，还是需要菌体液体培养物？
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1楼 2009-03-30 22:26:43
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charon1982

铁杆木虫 (著名写手)
你的问题莫名其妙！
你应该做液体培养，提取DNA扩增16S，测序！
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帮助虫友，提升自己
2楼2009-03-30 23:10:53
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
呵呵,也不要那么麻烦的啊,直接菌落PCR就完事儿了.斜面上面挑一点菌,然后在50-100ul的超纯水中涡旋充分混匀,水煮沸2min,12000rpm离心,取上清1ul作为模板,PCR就行了. 熟练了就很简单的,只要菌长出来,一小会就P出来了.

祝好运
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
3楼2009-03-31 01:37:56
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蓝色基因

金虫 (正式写手)
恩，还有上面一说？

楼上的，能具体一点说下么？

另外环境样品液可以这么做吗？
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4楼2009-03-31 09:30:56
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wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户
不是什么菌都适合菌落PCR的，有的比较容易破壁的可以直接拿来用，有的就很难直接扩出来。理想的方法还是培养出足够用的菌提取基因组DNA。
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金币是赌出来的
5楼2009-03-31 09:40:28
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jasco

木虫 (正式写手)
环境样品液需要涂平板，长出菌株的单克隆，然后用菌落pcr的方法就可以了，当然啦，提取总DNA做模板最好
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6楼2009-03-31 09:42:10
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redfoliage

铜虫 (初入文坛)
革兰氏阴性菌可以做菌落PCR，阳性菌不太适合做菌落PCR
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细节决定成败
7楼2009-03-31 10:47:09
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