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凡落Y

木虫 (小有名气)

[求助] 水溶性小肽经凝胶柱纯化后的纯化液能直接用硅胶板检测纯化效果吗?已有3人参与

实验室制备了一个小肽,水溶性的,经凝胶柱过柱纯化,洗脱溶剂为1%醋酸,请问这样接出来的纯化液能直接点硅胶板后二氯甲烷/甲醇=4/1展开爬板观察纯化效果吗?
之前都是纯化液先冻干,取冻干粉用四氢呋喃溶,点硅胶板爬板观察纯化效果。但是现在老板要求纯化液在冻干前知道样品纯化效果,收集纯品集中冻干,实验室就用纯化液(1%醋酸洗脱下来的)点硅胶板,电吹风吹干后,放入展开剂二氯甲烷/甲醇=4/1爬板,但是发现点样位置一直有东西在或爬的很慢,这样就不能判断纯化效果了。
请问大家,硅胶板点样爬板,能点用水溶解的样品吗?如果不能,是因为硅胶锁水吗?如果能,我们实验室做了很多测试,为什么都在点样位置处有样品爬不上去呢(已确定纯的样品也是爬出来的效果是分层的)?谢谢,希望懂的虫友们帮个忙。
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Where there is a will, there is a way.
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旧光zzz

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可以直接用醋酸纯化的纯化液吧,原则上选择产品的溶解剂溶剂只要能溶产物 不与产物发生反应就可以,但最好不要选极性大的作溶剂,爬不动。你的在点板出爬不上去,可能就是溶剂极性太大了。水的极性也很大
2楼2018-08-22 15:29:15
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春天外

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是不是可以考虑稍微调整一下展开剂二氯甲烷/甲醇=4/1的比例看看呢?或者可否调中性点板?  纯属个人猜想   见谅
学习工作
3楼2018-08-23 10:00:19
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天涯不归路

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

我们同事纯化出来的样品直接电泳,电泳可以,控制电压就可以控制速度了。
为了明天而努力
4楼2018-08-23 17:14:45
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