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Qp12345

新虫 (初入文坛)

[交流] 天然质粒提取问题 已有4人参与

我最近在提一个革兰氏阳性菌中的天然质粒,用过takara和天根的质粒小提试剂盒,可是都没有提出来,电泳什么条带都没有。我用的是三毫升菌液提的,提取之前将溶菌酶溶解在试剂盒的溶液1中,终浓度是20mg/ml,37度水浴2小时,其他的全部按照试剂盒说明操作,我不知道是因为破壁不成功导致提不出质粒还是因为我菌液量太少了。有没有大神可以给我一个详细的解答方案啊,我好急的……谢谢

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芜湖好江南

新虫 (初入文坛)

★ ★
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渊博震天: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-07-15 06:35:30
是不是有可能你的菌培养的太久了导致质粒丢失了

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2楼2018-07-14 23:14:35
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Qp12345

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 芜湖好江南 at 2018-07-14 23:14:35
是不是有可能你的菌培养的太久了导致质粒丢失了

可是我这个菌长得慢啊,不培养那么久根本长不起来。

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3楼2018-07-15 13:22:42
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碧豚湾

新虫 (小有名气)


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屁啊,我这有专门革兰氏阳性细菌质粒提取试剂盒。

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4楼2018-07-21 18:52:26
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Qp12345

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 碧豚湾 at 2018-07-21 18:52:26
屁啊,我这有专门革兰氏阳性细菌质粒提取试剂盒。

我用过革兰氏阳性菌的质粒提取试剂盒,还是没提出来,怎么解释…

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5楼2018-07-29 13:12:10
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diy患者

铁虫 (正式写手)


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确认里面有质粒?不是有抗性 ,就有质粒。培养的时候加对应的抗生素。加低浓度氯霉素可以增加质粒的拷贝数,但不知道是否适合你的菌。
6楼2018-07-30 22:33:34
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你好先生121

铁虫 (小有名气)


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你的细菌培养了多久?一般培养时间过久,菌体老化,质粒就会损失。建议培养10-14小时,用质粒大提
简简单单
7楼2018-09-13 12:18:41
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