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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » DEAE Sephadex A50凝胶再生过程探讨
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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czyw

金虫 (正式写手)

[交流] DEAE Sephadex A50凝胶再生过程探讨 已有1人参与

网上查到的A50凝胶再生流程是碱-水-酸-水-碱-水（或缓冲液），但是大生产过程中操作繁琐，水使用量比较大。后根据工程师建议再生调整为1M NaCl-2M HAC 30min-1M NaCl-0.5M NaOH 30min-1M NaCl-0.01M NaOH保存，流程虽然简化了，但是感觉对目的蛋白的结合能力不是很强，而且在碱处理后有泡沫出现。该流程是不是对目的蛋白清洗不够？并且水洗改成盐洗对凝胶质量有无影响？将哪位大神能提点建议，谢谢！
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1楼 2018-07-09 16:07:49
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hc-material

专家顾问 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
快要淘汰的填料，用DEAE-FF替换使用方便写些。水洗换成盐洗不会有影响，建议2M NaCl-1M NaOH 30分钟-1M HAC 30min--平衡缓冲液洗--保存在20%乙醇溶液中或者0.2%的叠氮化钠溶液中。
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2楼2018-07-11 16:31:20
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czyw

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hc-material at 2018-07-11 16:31:20
快要淘汰的填料，用DEAE-FF替换使用方便写些。水洗换成盐洗不会有影响，建议2M NaCl-1M NaOH 30分钟-1M HAC 30min--平衡缓冲液洗--保存在20%乙醇溶液中或者0.2%的叠氮化钠溶液中。

凝胶确实比较老了，但工业化过程中还是在用。这个凝胶能耐受1M NaOH吗，换成0.5 M NaOH如何？平衡缓冲液洗是方便下次使用前直接平衡吗？谢谢
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3楼2018-07-12 13:03:52
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