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czyw

金虫 (正式写手)

[交流] DEAE Sephadex A50凝胶再生过程探讨 已有1人参与

网上查到的A50凝胶再生流程是碱-水-酸-水-碱-水(或缓冲液),但是大生产过程中操作繁琐,水使用量比较大。后根据工程师建议再生调整为1M NaCl-2M HAC 30min-1M NaCl-0.5M NaOH 30min-1M NaCl-0.01M NaOH保存,流程虽然简化了,但是感觉对目的蛋白的结合能力不是很强,而且在碱处理后有泡沫出现。该流程是不是对目的蛋白清洗不够?并且水洗改成盐洗对凝胶质量有无影响?将哪位大神能提点建议,谢谢!
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hc-material

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
快要淘汰的填料,用DEAE-FF替换使用方便写些。水洗换成盐洗不会有影响,建议2M NaCl-1M NaOH 30分钟-1M HAC 30min--平衡缓冲液洗--保存在20%乙醇溶液中或者0.2%的叠氮化钠溶液中。
2楼2018-07-11 16:31:20
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czyw

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hc-material at 2018-07-11 16:31:20
快要淘汰的填料,用DEAE-FF替换使用方便写些。水洗换成盐洗不会有影响,建议2M NaCl-1M NaOH 30分钟-1M HAC 30min--平衡缓冲液洗--保存在20%乙醇溶液中或者0.2%的叠氮化钠溶液中。

凝胶确实比较老了,但工业化过程中还是在用。这个凝胶能耐受1M NaOH吗,换成0.5 M NaOH如何?平衡缓冲液洗是方便下次使用前直接平衡吗?谢谢
3楼2018-07-12 13:03:52
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