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13937923754

新虫 (初入文坛)

[交流] 新手小白刚开始做WB遇到问题 已有1人参与

刚开始做wb,用的有色marker,转膜温度有些高,冰水浴控制不住,但nc膜上有marker,一抗用生工买的封闭液稀释,二抗用pbst稀释的,封闭室温摇2个小时,4度过夜孵育一抗,然后二抗室温摇一个小时,最后用美仑的飞克特超敏ECL发光液,因为没有合适的成像一直选用的胶片曝光,但有个师兄说,如果ECL发光液没有肉眼可见荧光,就没有必要再浪费胶片了。做了好多次确实没有肉眼可见荧光。
求大神指导一下过程有没有什么问题,还有就是膜孵育完ECL发光液到底有无肉眼可见荧光,有用过同牌子发光液的小伙伴告知我一下,不胜感激
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13937923754

新虫 (初入文坛)

自己顶一下
2楼2018-07-08 13:29:15
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13937923754

新虫 (初入文坛)

求大家帮我看一下,我感觉毕不了业了

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3楼2018-07-08 16:14:04
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luckydog52

木虫 (著名写手)

还真没注意肉眼能不能看。不过胶片比较敏感,即使肉眼看不清,你可以延长曝光时间,也能看到

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自信源于一次次成功的积累
4楼2018-07-08 21:35:19
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13937923754

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by luckydog52 at 2018-07-08 21:35:19
还真没注意肉眼能不能看。不过胶片比较敏感,即使肉眼看不清,你可以延长曝光时间,也能看到

不是这个意思,是把膜浸在ecl发光液里面,如果一段时间后nc膜上没有出现可见荧光是不是就说明实验失败了,也就没必要进行后面的曝光了

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5楼2018-07-08 22:05:11
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luckydog52

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 13937923754 at 2018-07-08 22:05:11
不是这个意思,是把膜浸在ecl发光液里面,如果一段时间后nc膜上没有出现可见荧光是不是就说明实验失败了,也就没必要进行后面的曝光了
...

肉眼看不见发光也应曝光,最后有没有条带不是用眼睛可见判断的。不曝光你前面用的材料都浪费了
没有必要省胶片

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自信源于一次次成功的积累
6楼2018-07-08 23:30:25
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