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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 酿酒酵母菌落PCR步骤
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s850306012

新虫 (小有名气)

[交流] 酿酒酵母菌落PCR步骤

求酿酒酵母菌落PCR所使用的模板，该如何进行破壁才能有效进行菌落PCR

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1楼 2018-07-08 09:48:59
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
沸水浴5分钟即可

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2楼2018-07-08 10:14:40
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s850306012

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2018-07-08 10:14:40
沸水浴5分钟即可

试过，没成功呢，还有别的方法么

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3楼2018-07-08 12:06:31
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luckydog52

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by s850306012 at 2018-07-08 12:06:31
试过，没成功呢，还有别的方法么
...

酵母遗传学试验方法里面有没有?

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自信源于一次次成功的积累
4楼2018-07-08 21:40:27
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luckydog52

木虫 (著名写手)
有个缓冲液，长时间不做酵母有点忘了

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自信源于一次次成功的积累
5楼2018-07-08 21:41:45
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ghst110

银虫 (正式写手)
★
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配置20mM NaoH +  2% Tween 20，裂解液。挑取酵母菌落，或菌液10ul 于 30ul 裂解液内。95℃  5-10min， 取2-4ul上清液作模板（50u）。如果没有吐温20，可以不加。
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s850306012 s850306012
*才随遇长，识以穷精*
6楼2018-07-10 16:54:01
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s850306012

新虫 (小有名气)
送红花一朵
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6楼: Originally posted by ghst110 at 2018-07-10 16:54:01
配置20mM NaoH +  2% Tween 20，裂解液。挑取酵母菌落，或菌液10ul 于 30ul 裂解液内。95℃  5-10min， 取2-4ul上清液作模板（50u）。如果没有吐温20，可以不加。

好的，谢谢

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7楼2018-07-11 11:05:09
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s850306012

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by ghst110 at 2018-07-10 16:54:01
配置20mM NaoH +  2% Tween 20，裂解液。挑取酵母菌落，或菌液10ul 于 30ul 裂解液内。95℃  5-10min， 取2-4ul上清液作模板（50u）。如果没有吐温20，可以不加。

方法我试了一下，还是没有效果呢，还有其他方法么

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8楼2018-07-18 22:26:18
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ghst110

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by s850306012 at 2018-07-18 22:26:18
方法我试了一下，还是没有效果呢，还有其他方法么
...

不会吧，碱裂解对植物都可以easily搞定，可能是你用的PCR 酶不够给力吗？
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*才随遇长，识以穷精*
9楼2018-07-19 11:11:43
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