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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 上样的时候样品不能沉入孔
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宫点90519

铜虫 (初入文坛)

[求助] 上样的时候样品不能沉入孔

新手刚开始跑蛋白（SDS-PAGE）胶。是这样的，制胶还好，就是上样的时候样品会浮起来加不进孔洞中（照常理说直接在小板边缘加入会由于重力沉下去）。我所用的蛋白质是BSA，浓度是1.32μg/ml，取样的是样品20μl，buffer是20μl，混合均匀离心煮胶后再离心上的样，每次上样5μl。请问各位大牛到底是怎么回事？
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1楼 2018-07-04 19:12:48
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chen5805

至尊木虫 (职业作家)

资深木虫
是不是胶孔里有残胶，把胶孔堵住了？

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2楼2018-07-04 19:23:52
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宫点90519

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by chen5805 at 2018-07-04 19:23:52
是不是胶孔里有残胶，把胶孔堵住了？

不是。有气泡，但是用电泳液把气泡都清除了啊。
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3楼2018-07-04 19:40:49
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邢不邢

新虫 (初入文坛)
是不是加样太快了 枪要抵住玻璃板倾斜加。buffer里有甘油吗

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4楼2018-07-18 21:35:32
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草哥cium

新虫 (正式写手)
上样缓冲液是不是不好

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5楼2018-07-18 23:11:46
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宫点90519

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 草哥cium at 2018-07-18 17:11:46
上样缓冲液是不是不好

找到原因啦。因为我做模型反应时使用的甲醇和PBS的体积比是1:1，所以在制样的时候也用的体积比是1:1，所以加不进去。把甲醇的体积变小就可以了。上样缓冲液没有问题，谢谢啦。
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6楼2018-07-21 16:29:14
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木质化的?

新虫 (初入文坛)
我觉得跟你的buffer有很大关系

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7楼2018-07-23 09:59:02
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