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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 酶的抑制常数Ki
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呆呆戴戴

新虫 (著名写手)

[求助] 酶的抑制常数Ki 已有1人参与

得到了一种酶 想看一下酶的终产物抑制常数Ki，看文献是用各种浓度的终产物以不同时间孵育后测定酶活，但是不知道怎样计算，求各位帮助

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1楼 2018-06-30 12:04:57
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2013jpwang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
snoopytbw: 金币+2, 略有帮助 2018-07-03 08:46:57
GraphPad prism5.0 软件的 Competitive inhibition可以计算抑制剂常数
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2楼2018-07-02 10:47:17
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呆呆戴戴

新虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 2013jpwang at 2018-07-02 10:47:17
GraphPad prism5.0 软件的 Competitive inhibition可以计算抑制剂常数

请问 实验中要设置两种底物浓度进行测定吗 横纵坐标是什么 单位是什么

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3楼2018-07-03 00:21:03
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2013jpwang

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
snoopytbw: 金币+2, 应助指数+1, 略有帮助 2018-07-03 08:47:11
引用回帖:
3楼: Originally posted by 呆呆戴戴 at 2018-07-03 00:21:03
请问 实验中要设置两种底物浓度进行测定吗 横纵坐标是什么 单位是什么
...

我用的方法是测定不同抑制剂浓度（测了3个浓度）对酶催化活力的影响，底物浓度也是不同的有点类似于测定Km值时的底物浓度。具体的你可以看下这篇参考文献Estimation of K i in a Competitive Enzyme-Inhibition Model: Comparisons Among Three Methods of Data Analysis
实验顺利
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4楼2018-07-03 08:36:56
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呆呆戴戴

新虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 2013jpwang at 2018-07-03 08:36:56
我用的方法是测定不同抑制剂浓度（测了3个浓度）对酶催化活力的影响，底物浓度也是不同的有点类似于测定Km值时的底物浓度。具体的你可以看下这篇参考文献Estimation of K i in a Competitive Enzyme-Inhibition Mo ...

看了一遍 想再问问你...kmapp是加抑制物时测的吗 那就是一个抑制物浓度 对应一组km/Vmax  其中这一组的此抑制物加到不同底物浓度中 是这样的吗

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5楼2018-07-03 21:04:44
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呆呆戴戴

新虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 2013jpwang at 2018-07-03 08:36:56
我用的方法是测定不同抑制剂浓度（测了3个浓度）对酶催化活力的影响，底物浓度也是不同的有点类似于测定Km值时的底物浓度。具体的你可以看下这篇参考文献Estimation of K i in a Competitive Enzyme-Inhibition Mo ...

prism中你说的竞争性抑制这个在哪里？

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6楼2018-07-03 21:10:29
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huangyan0517

金虫 (小有名气)
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6楼: Originally posted by 呆呆戴戴 at 2018-07-03 21:10:29
prism中你说的竞争性抑制这个在哪里？
...

楼主知道怎么求Ki了吗？你是用剩余酶活百分比计算的吗？我看文献里是用反应速率计算，那就是要做标准曲线，然后求代谢产物的生成速率吗？
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时间在哪里，成就就在哪里
7楼2018-07-06 21:35:36
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呆呆戴戴

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7楼: Originally posted by huangyan0517 at 2018-07-06 21:35:36
楼主知道怎么求Ki了吗？你是用剩余酶活百分比计算的吗？我看文献里是用反应速率计算，那就是要做标准曲线，然后求代谢产物的生成速率吗？...

我还是不会 文献里没详细说 你说代谢产物生成速率？和ki有什么关系

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8楼2018-07-07 00:33:53
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huangyan0517

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 呆呆戴戴 at 2018-07-07 00:33:53
我还是不会 文献里没详细说 你说代谢产物生成速率？和ki有什么关系
...

底物浓度和抑制剂浓度都是方案设计好的，那你检测的是什么？
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时间在哪里，成就就在哪里
9楼2018-07-07 10:08:26
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qqq820929

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 2013jpwang at 2018-07-03 08:36:56
我用的方法是测定不同抑制剂浓度（测了3个浓度）对酶催化活力的影响，底物浓度也是不同的有点类似于测定Km值时的底物浓度。具体的你可以看下这篇参考文献Estimation of K i in a Competitive Enzyme-Inhibition Mo ...

可以给我发一下这篇文章吗？我现在下不下来。656029940@qq.com 感谢
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10楼2021-04-08 19:28:42
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