24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2287  |  回复: 7

zhaomsy

新虫 (初入文坛)

[求助] HIS标签表达后过镍柱只能挂柱,20nm咪唑或磷酸盐洗脱就掉,求助如何进行纯化 已有2人参与

酵母表达蛋白加了his标签,跑胶证明his表达出来了,但是只能挂柱,磷酸盐或者低浓度咪唑洗脱就掉,求助如何改进纯化?谢谢大家
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wuhu0612331

铜虫 (正式写手)

★ ★ ★
youlinglyw: 金币+3, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2018-07-01 15:58:47
跑胶证明,是不是用WB验证过,确保his表达了,多低的咪唑会掉,掉了多少

发自小木虫Android客户端
2楼2018-06-28 11:27:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)


★ ★
zhaomsy(youlinglyw代发): 金币+2, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2018-07-01 15:58:53
purimag得Ni磁珠试试

发自小木虫IOS客户端
3楼2018-06-28 13:09:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芜意橙

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
youlinglyw: 金币+5, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2018-07-01 15:59:16
表达量还行的话,可以加长His试一下,如果表达量不高,这种方法就不行
过去的不能改变,未来的你不知道
4楼2018-07-01 14:23:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小豆豆海丽

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

5楼2018-09-18 21:59:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

结合力太弱,于很多因素有关,比如填料的质量,改用高载量的填料,柱子没平衡到位,彻底平衡,缓冲液ph太低,调到8.0左右。低浓度就能洗脱下来是好事
6楼2018-09-19 10:08:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小蜗牛136

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

7楼2018-10-04 02:14:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

L_大松子

新虫 (正式写手)

我是新手,我觉得酵母体外表达蛋白挺纯的吧,要求不是太高的话我觉得可以拿个超滤管浓缩下。

发自小木虫Android客户端
8楼2019-02-24 10:42:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhaomsy 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 hvkbtfonbv 2026-05-23 4/200 2026-05-24 17:21 by 75ui6h7z2t
[教师之家] 论文撤稿了 +4 bjvtcliu 2026-05-24 6/300 2026-05-24 17:11 by jurkat.1640
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 hvkbtfonbv 2026-05-23 3/150 2026-05-24 17:10 by 75ui6h7z2t
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 hvkbtfonbv 2026-05-23 3/150 2026-05-24 17:01 by 75ui6h7z2t
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 a2tycdlnq1 2026-05-23 5/250 2026-05-24 16:21 by hhx1yx9evi
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 a2tycdlnq1 2026-05-23 4/200 2026-05-24 16:16 by hhx1yx9evi
[基金申请] 河北省自然科学基金 +6 Peterchao 2026-05-18 9/450 2026-05-24 16:02 by 130067131
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 pmo95bazuy 2026-05-23 8/400 2026-05-24 15:56 by 1uy1ht2y9r
[基金申请] 西安交大新媒学院副院长用撤稿论文结题 +3 bjvtcliu 2026-05-24 5/250 2026-05-24 10:16 by kudofaye
[基金申请] 青B发送上会通知了吗 +5 chemBioBro 2026-05-22 7/350 2026-05-23 12:35 by zhuifengzhy
[考博] 博士申请 +3 焦晓明 2026-05-21 3/150 2026-05-23 11:26 by mlc840311
[论文投稿] 投稿求助,期刊 +4 希冀,有书读 2026-05-20 8/400 2026-05-22 10:16 by 希冀,有书读
[文学芳草园] 献血感触 +7 呀呀好傻 2026-05-19 13/650 2026-05-21 20:15 by 呀呀好傻
[基金申请] 面上本子正文33页,违规吗?会被低分嘛? +14 1234567wang 2026-05-17 16/800 2026-05-21 17:58 by 脆脆的饼干
[基金申请] 国自然评分 +4 无名者登山 2026-05-20 5/250 2026-05-21 16:35 by swuq
[基金申请] 国自然上会要求 +7 无名者登山 2026-05-18 11/550 2026-05-21 15:50 by draco1987
[基金申请] 评审有感 +15 popular289 2026-05-18 26/1300 2026-05-21 10:35 by 西葫芦炒鸡蛋
[有机交流] 反应很差,大量原料没有反应 5+3 Mr.Zot 2026-05-19 8/400 2026-05-20 22:19 by Equinoxhua
[考博] 博士申请 +5 星…… 2026-05-18 6/300 2026-05-18 23:49 by 糊糊涂涂好
[硕博家园] 我在等一个没有答案的答案 +3 Love_MH 2026-05-17 3/150 2026-05-18 02:22 by 竹林孤影
信息提示
请填处理意见