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孤单芭蕾527

新虫 (初入文坛)

[求助] 农杆菌检测

我之前转化了GV3101的农杆菌,载体抗氨卞,由于转化效率很低,我转化涂板后先做了菌斑PCR,将鉴定出来的菌再用YEB摇起来,摇36小时后,在做菌检PCR就又什么都跑不出来了,在胶孔上非常亮,是什么原因呢?求助各位大佬!

@biostar2009 发自小木虫IOS客户端
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木元雨

木虫 (职业作家)

你可以直接挑菌斑加相应抗生素摇起来后菌液PCR检测

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2楼2018-12-31 00:22:30
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Eternity宇

禁虫 (著名写手)

本帖内容被屏蔽

3楼2019-02-17 21:17:28
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freehomefc

新虫 (小有名气)

转农杆菌后一般只要转进去了,都能检测出条带来,我摇菌用的是加抗生素的LB ,想知道YEB.是什么?

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4楼2019-05-15 23:52:32
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王查查23

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

5楼2019-05-16 19:19:53
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策策cece

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by freehomefc at 2019-05-15 23:52:32
转农杆菌后一般只要转进去了,都能检测出条带来,我摇菌用的是加抗生素的LB ,想知道YEB.是什么?

大肠杆菌培养基LB农杆菌培养基YEP

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6楼2019-06-24 22:11:08
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策策cece

新虫 (初入文坛)

可能是因为农杆菌TI质粒太大了吧,跑胶的电压在低一点,时间短,条带过大,没跑出来,就胶孔特别量吧

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7楼2019-06-24 22:13:05
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策策cece

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 策策cece at 2019-06-24 22:13:05
可能是因为农杆菌TI质粒太大了吧,跑胶的电压在低一点,时间短,条带过大,没跑出来,就胶孔特别量吧

用相同的引物坚定的话,应该是有的呀,我也不知道了,不好意思,打扰了

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8楼2019-06-24 22:15:47
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