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孤单芭蕾527

新虫 (初入文坛)

[求助] 农杆菌检测

我之前转化了GV3101的农杆菌，载体抗氨卞，由于转化效率很低，我转化涂板后先做了菌斑PCR，将鉴定出来的菌再用YEB摇起来，摇36小时后，在做菌检PCR就又什么都跑不出来了，在胶孔上非常亮，是什么原因呢？求助各位大佬！

@biostar2009 发自小木虫IOS客户端
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1楼 2018-06-26 17:25:03
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木元雨

木虫 (职业作家)
你可以直接挑菌斑加相应抗生素摇起来后菌液PCR检测

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2楼2018-12-31 00:22:30
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Eternity宇

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
3楼2019-02-17 21:17:28
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freehomefc

新虫 (小有名气)
转农杆菌后一般只要转进去了，都能检测出条带来，我摇菌用的是加抗生素的LB ，想知道YEB.是什么？

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4楼2019-05-15 23:52:32
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王查查23

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
5楼2019-05-16 19:19:53
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策策cece

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by freehomefc at 2019-05-15 23:52:32
转农杆菌后一般只要转进去了，都能检测出条带来，我摇菌用的是加抗生素的LB ，想知道YEB.是什么？

大肠杆菌培养基LB农杆菌培养基YEP

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6楼2019-06-24 22:11:08
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策策cece

新虫 (初入文坛)
可能是因为农杆菌TI质粒太大了吧，跑胶的电压在低一点，时间短，条带过大，没跑出来，就胶孔特别量吧

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7楼2019-06-24 22:13:05
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策策cece

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 策策cece at 2019-06-24 22:13:05
可能是因为农杆菌TI质粒太大了吧，跑胶的电压在低一点，时间短，条带过大，没跑出来，就胶孔特别量吧

用相同的引物坚定的话，应该是有的呀，我也不知道了，不好意思，打扰了

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8楼2019-06-24 22:15:47
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