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孤单芭蕾527
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[
求助
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农杆菌检测
我之前转化了GV3101的农杆菌,载体抗氨卞,由于转化效率很低,我转化涂板后先做了菌斑PCR,将鉴定出来的菌再用YEB摇起来,摇36小时后,在做菌检PCR就又什么都跑不出来了,在胶孔上非常亮,是什么原因呢?求助各位大佬!
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biostar2009
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2018-06-26 17:25:03
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木元雨
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专业: 作物分子育种
你可以直接挑菌斑加相应抗生素摇起来后菌液PCR检测
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2018-12-31 00:22:30
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2019-02-17 21:17:28
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转农杆菌后一般只要转进去了,都能检测出条带来,我摇菌用的是加抗生素的LB ,想知道YEB.是什么?
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2019-05-15 23:52:32
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4楼
:
Originally posted by
freehomefc
at 2019-05-15 23:52:32
转农杆菌后一般只要转进去了,都能检测出条带来,我摇菌用的是加抗生素的LB ,想知道YEB.是什么?
大肠杆菌培养基LB农杆菌培养基YEP
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6楼
2019-06-24 22:11:08
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可能是因为农杆菌TI质粒太大了吧,跑胶的电压在低一点,时间短,条带过大,没跑出来,就胶孔特别量吧
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7楼
2019-06-24 22:13:05
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7楼
:
Originally posted by
策策cece
at 2019-06-24 22:13:05
可能是因为农杆菌TI质粒太大了吧,跑胶的电压在低一点,时间短,条带过大,没跑出来,就胶孔特别量吧
用相同的引物坚定的话,应该是有的呀,我也不知道了,不好意思,打扰了
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8楼
2019-06-24 22:15:47
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