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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » HPLC 请教！
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ay45

金虫 (小有名气)

[交流] HPLC 请教！

Sample Text我分析的样品中，液相色谱图中两种成分的保留时间就相隔0.8min，这可行吗？在谱图上，这两种成分是可以清楚分开的，我就怕那个时间间隔太短了。还有就是我用乙腈-水的配比是19：81洗柱子时，柱压很高，这会是什么引起的呢？
这方面的高手指点下。谢谢！！
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1楼 2009-03-27 22:01:30
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嘉木

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
ay45(金币+3,VIP+0):原来这样呀 3-27 22:50
能分开就可以了啊
间隔短没关系
柱压高，看你用什么洗柱子了
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2楼2009-03-27 22:08:55
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ay45

金虫 (小有名气)
我的流动相是乙腈-水，我用梯度洗脱，进样后柱压随着乙腈浓度增大而下降了10bar，但是只冲乙腈时柱压就只是40bar左右而已。这会是什么问题呢？
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3楼2009-03-27 22:29:45
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嘉木

金虫 (正式写手)
★
jsys(金币+1,VIP+0):谢谢参与！ 3-28 13:54
用纯ACN冲洗的时候柱压就是这么高的啊
水相越大，柱压越高
如果你做的样品或者流动相含盐的话，记得先要用80的水冲洗，然后再换纯ACN，不然可能会堵柱子
还有，我一般是用纯甲醇保存柱子的，因为甲醇不长菌，不知道你的柱子是什么样的，说明书上说要用乙腈保存么
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4楼2009-03-27 23:05:55
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chiraler

荣誉版主 (著名写手)
★
jsys(金币+1,VIP+0):谢谢参与！ 3-28 13:55
1、能分开就行，0.8min完全可以；
2、柱压高原因很多：比如：purge阀里面的白头很可能脏了，
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尊重结果，享受过程！
5楼2009-03-28 00:09:04
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sonydad
6楼2009-03-28 07:16:18
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feijian

木虫 (正式写手)
★
ay45(金币+1,VIP+0):谢谢！ 3-28 12:42
能分开就好，你可以算一下分离度，R>=1.5就好！柱压高，柱子的问题！
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谁懂CNAS,CMA计量认证的，付费咨询feijian2000@126.com,QQ：415572318~~
7楼2009-03-28 07:47:44
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uliya809

木虫 (正式写手)
★
ay45(金币+1,VIP+0):谢谢！ 3-28 12:39
0.8认为是完全分开了根本就没是，水比例上升主要搞是正常的，而且主要和粘度有关系，梯度时粘度可能升高
！
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8楼2009-03-28 09:07:55
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ay45

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 嘉木 at 2009-3-27 23:05:
用纯ACN冲洗的时候柱压就是这么高的啊
水相越大，柱压越高
如果你做的样品或者流动相含盐的话，记得先要用80的水冲洗，然后再换纯ACN，不然可能会堵柱子
还有，我一般是用纯甲醇保存柱子的，因为甲醇不长菌，不 ...

我测的是三七中的人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1，三七皂苷R1。流动相是不含盐的。我用的是C18柱，那个保存柱子是什么意思呀？呵呵呵  我周一去实验室看看有没有那样的说明。。
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9楼2009-03-28 12:38:23
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ay45

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by feijian at 2009-3-28 07:47:
能分开就好，你可以算一下分离度，R>=1.5就好！柱压高，柱子的问题！

但是以前做分析时柱压没有那么高的。。我换了一根型号一样的新柱，还是那样高。所以我怀疑是流动相配比问题，粘度这个吧   这方面我不是很懂，
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10楼2009-03-28 12:41:50
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