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ay45

金虫 (小有名气)

[交流] HPLC 请教!

Sample Text我分析的样品中,液相色谱图中两种成分的保留时间就相隔0.8min,这可行吗?在谱图上,这两种成分是可以清楚分开的,我就怕那个时间间隔太短了。还有就是我用乙腈-水的配比是19:81洗柱子时,柱压很高,这会是什么引起的呢?
这方面的高手指点下。谢谢!!
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嘉木

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
ay45(金币+3,VIP+0):原来这样呀 3-27 22:50
能分开就可以了啊
间隔短没关系
柱压高,看你用什么洗柱子了
2楼2009-03-27 22:08:55
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ay45

金虫 (小有名气)

我的流动相是乙腈-水,我用梯度洗脱,进样后柱压随着乙腈浓度增大而下降了10bar,但是只冲乙腈时柱压就只是40bar左右而已。这会是什么问题呢?
3楼2009-03-27 22:29:45
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嘉木

金虫 (正式写手)


jsys(金币+1,VIP+0):谢谢参与! 3-28 13:54
用纯ACN冲洗的时候柱压就是这么高的啊
水相越大,柱压越高
如果你做的样品或者流动相含盐的话,记得先要用80的水冲洗,然后再换纯ACN,不然可能会堵柱子
还有,我一般是用纯甲醇保存柱子的,因为甲醇不长菌,不知道你的柱子是什么样的,说明书上说要用乙腈保存么
4楼2009-03-27 23:05:55
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chiraler

荣誉版主 (著名写手)


jsys(金币+1,VIP+0):谢谢参与! 3-28 13:55
1、能分开就行,0.8min完全可以;
2、柱压高原因很多:比如:purge阀里面的白头很可能脏了,
尊重结果,享受过程!
5楼2009-03-28 00:09:04
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6楼2009-03-28 07:16:18
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feijian

木虫 (正式写手)


ay45(金币+1,VIP+0):谢谢! 3-28 12:42
能分开就好,你可以算一下分离度,R>=1.5就好!柱压高,柱子的问题!
谁懂CNAS,CMA计量认证的,付费咨询feijian2000@126.com,QQ:415572318~~
7楼2009-03-28 07:47:44
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uliya809

木虫 (正式写手)


ay45(金币+1,VIP+0):谢谢! 3-28 12:39
0.8认为是完全分开了根本就没是,水比例上升主要搞是正常的,而且主要和粘度有关系,梯度时粘度可能升高
8楼2009-03-28 09:07:55
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ay45

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 嘉木 at 2009-3-27 23:05:
用纯ACN冲洗的时候柱压就是这么高的啊
水相越大,柱压越高
如果你做的样品或者流动相含盐的话,记得先要用80的水冲洗,然后再换纯ACN,不然可能会堵柱子
还有,我一般是用纯甲醇保存柱子的,因为甲醇不长菌,不 ...

我测的是三七中的人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1,三七皂苷R1。流动相是不含盐的。我用的是C18柱,那个保存柱子是什么意思呀?呵呵呵  我周一去实验室看看有没有那样的说明。。
9楼2009-03-28 12:38:23
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ay45

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by feijian at 2009-3-28 07:47:
能分开就好,你可以算一下分离度,R>=1.5就好!柱压高,柱子的问题!

但是以前做分析时柱压没有那么高的。。我换了一根型号一样的新柱,还是那样高。所以我怀疑是流动相配比问题,粘度这个吧   这方面我不是很懂,
10楼2009-03-28 12:41:50
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