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毕赤酵母菌

新虫 (初入文坛)

[交流] 肝素酶I的储存

请问肝素酶I冻干后怎么溶解呀,是在pH 7.5的Tris-HCl缓冲液中冻干的,冻干后需要测定酶活力,但是用水和缓冲液都无法溶解,请问大家都是怎么做的(?o?;

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biosci

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不可能吧,溶解后的不溶残渣颗粒,可以离心或者过滤除去

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2楼2018-06-22 10:25:27
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天涯不归路

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冻干去掉的是水,等量的水去溶解。如果溶解有问题,估计你的冻干工艺需要优化。复溶是冻干最基本的一个标准。
为了明天而努力
3楼2018-06-22 13:42:55
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毕赤酵母菌

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2018-06-22 10:25:27
不可能吧,溶解后的不溶残渣颗粒,可以离心或者过滤除去

我用20ul的体积去冻干的,冻干后有点像网状物沾在管壁上,用水溶解根本不溶,试着看加热会不会松溶,也没有溶解,而且加热本身会使酶失活,不知道怎么办了

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4楼2018-06-25 09:35:45
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毕赤酵母菌

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 天涯不归路 at 2018-06-22 13:42:55
冻干去掉的是水,等量的水去溶解。如果溶解有问题,估计你的冻干工艺需要优化。复溶是冻干最基本的一个标准。

我是借别人的冻干机用的,冻干之前在-80摄氏度冰箱放了18个小时,然后冻干了24小时,冻干过程我都是不清楚的

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5楼2018-06-25 09:38:23
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天涯不归路

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5楼: Originally posted by 毕赤酵母菌 at 2018-06-25 09:38:23
我是借别人的冻干机用的,冻干之前在-80摄氏度冰箱放了18个小时,然后冻干了24小时,冻干过程我都是不清楚的
...

这样肯定不行的啊!起码要一下冻干曲线,或者冻干工艺啊!免得高温把你样品破坏了!!
为了明天而努力
6楼2018-06-25 11:34:38
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莫笑天下

新虫 (初入文坛)


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冻干是一个物理变化过程,样品在冻结后。高真空状态下,通过升华和蒸发除去自由水和结合水,所以冻干前是溶液的话,只要冻干工艺没问题,以及冻干过程没有问题,复溶不会有问题
7楼2018-06-26 16:33:26
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毕赤酵母菌

新虫 (初入文坛)

找到原因了,是我的缓冲液盐浓度太高了,导致的蛋白质盐析现象。。谢谢大家

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8楼2018-06-29 00:45:23
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siyuyouai

银虫 (小有名气)


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请问你的盐浓度是多少?
9楼2021-09-22 15:01:01
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