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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 肝素酶I的储存
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毕赤酵母菌

新虫 (初入文坛)

[交流] 肝素酶I的储存

请问肝素酶I冻干后怎么溶解呀，是在pH 7.5的Tris-HCl缓冲液中冻干的，冻干后需要测定酶活力，但是用水和缓冲液都无法溶解，请问大家都是怎么做的(?o?;

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1楼 2018-06-22 09:58:37
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不可能吧，溶解后的不溶残渣颗粒，可以离心或者过滤除去

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2楼2018-06-22 10:25:27
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天涯不归路

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
冻干去掉的是水，等量的水去溶解。如果溶解有问题，估计你的冻干工艺需要优化。复溶是冻干最基本的一个标准。
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为了明天而努力
3楼2018-06-22 13:42:55
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毕赤酵母菌

新虫 (初入文坛)
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2楼: Originally posted by biosci at 2018-06-22 10:25:27
不可能吧，溶解后的不溶残渣颗粒，可以离心或者过滤除去

我用20ul的体积去冻干的，冻干后有点像网状物沾在管壁上，用水溶解根本不溶，试着看加热会不会松溶，也没有溶解，而且加热本身会使酶失活，不知道怎么办了

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4楼2018-06-25 09:35:45
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毕赤酵母菌

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 天涯不归路 at 2018-06-22 13:42:55
冻干去掉的是水，等量的水去溶解。如果溶解有问题，估计你的冻干工艺需要优化。复溶是冻干最基本的一个标准。

我是借别人的冻干机用的，冻干之前在-80摄氏度冰箱放了18个小时，然后冻干了24小时，冻干过程我都是不清楚的

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5楼2018-06-25 09:38:23
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天涯不归路

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5楼: Originally posted by 毕赤酵母菌 at 2018-06-25 09:38:23
我是借别人的冻干机用的，冻干之前在-80摄氏度冰箱放了18个小时，然后冻干了24小时，冻干过程我都是不清楚的
...

这样肯定不行的啊！起码要一下冻干曲线，或者冻干工艺啊！免得高温把你样品破坏了！！
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为了明天而努力
6楼2018-06-25 11:34:38
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莫笑天下

新虫 (初入文坛)
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冻干是一个物理变化过程，样品在冻结后。高真空状态下，通过升华和蒸发除去自由水和结合水，所以冻干前是溶液的话，只要冻干工艺没问题，以及冻干过程没有问题，复溶不会有问题
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7楼2018-06-26 16:33:26
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毕赤酵母菌

新虫 (初入文坛)
找到原因了，是我的缓冲液盐浓度太高了，导致的蛋白质盐析现象。。谢谢大家

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8楼2018-06-29 00:45:23
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siyuyouai

银虫 (小有名气)
★
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请问你的盐浓度是多少？
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9楼2021-09-22 15:01:01
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