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菌定量和定性检测，为什么加水也能扩出来
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我最近在做菌的定植和母体传播，实验是这样的给小鼠灌喂一种特异菌，然后一定时间后检测该菌在肠道的定植情况和在胎盘中的定植情况。在采用荧光定量和普通PCR检测，结果发现普通定量中，空白阴性对照（加dd水，就是PCR时不加入DNA,加去离子灭菌水）也发现有条带，荧光定量是也检测出了循环值，而且低于灌喂该种菌的小鼠中的循环值。希望大神能给点意见，为什么pcr中不加入DNA也扩增出来了该条带，引物的特异性，退火温度都检测过了，没问题，特异性都很好。望大神解答，谢谢了！ 发自小木虫Android客户端 |
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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我最近在做菌的定植和母体传播，实验是这样的给小鼠灌喂一种特异菌，然后一定时间后检测该菌在肠道的定植情况和在胎盘中的定植情况。在采用荧光定量和普通PCR检测，结果发现普通定量中，空白阴性对照（加dd水，就是PCR时不加入DNA,加去离子灭菌水）也发现有条带，荧光定量是也检测出了循环值，而且低于灌喂该种菌的小鼠中的循环值。希望大神能给点意见，为什么pcr中不加入DNA也扩增出来了该条带，引物的特异性，退火温度都检测过了，没问题，特异性都很好。望大神解答，谢谢了！ 您好 你检测的基因只有一个？pcr的跑胶情况？很多情况你要阐述？ pcr 问题通常采用排查的办法，因此验证的环节多一些。 |
175楼2018-06-28 10:04:29