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幻想贝贝

新虫 (小有名气)

[求助] 克隆未知基因已有2人参与

如何设计兼并引物克隆某个蛋白的全长基因序列?

@youlinglyw @biostar2009 发自小木虫Android客户端
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渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议你向引物设计公司的技术咨询一下喔

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2楼2018-06-23 07:48:22
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匿名

用户注销 (正式写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-06-26 07:56:28
本帖仅楼主可见
3楼2018-06-25 20:20:20
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幻想贝贝

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 大-木-虫 at 2018-06-25 20:20:20
寻找其他物种同源基因,找到保守氨基酸设计就行,不过一般不用这么麻烦,直接找到亲缘关系最近的 设计,不要设计简并引物

找同种菌株的设计引物,PCR后没有目的条带

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4楼2018-06-26 08:19:51
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白话八股

金虫 (正式写手)

同种菌株做,可以尝试把引物长度缩短,降低退火温度试试

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最爱的那个人会出现在身边。
5楼2018-06-26 09:21:49
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幻想贝贝

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 白话八股 at 2018-06-26 09:21:49
同种菌株做,可以尝试把引物长度缩短,降低退火温度试试

好的谢谢,但是我设计的退火温度都是63℃左右还有再低吗,那多少度合适呢

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6楼2018-06-26 10:03:27
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白话八股

金虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 幻想贝贝 at 2018-06-26 10:03:27
好的谢谢,但是我设计的退火温度都是63℃左右还有再低吗,那多少度合适呢
...

看你的pcr酶,55试一试

发自小木虫Android客户端
最爱的那个人会出现在身边。
7楼2018-06-26 10:20:15
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