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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 硫酸铵沉淀下来蛋白含量极低，有很多杂质
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liyao1992

禁虫 (初入文坛)
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1楼2018-06-08 13:16:09
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Crazy cat

铜虫 (小有名气)
是摇瓶发酵吗，最开始原样有多少量？

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2楼2018-06-08 15:20:41
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liyao1992

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3楼2018-06-08 15:52:30
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liyao1992

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4楼2018-06-08 15:53:32
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wuhu0612331

铜虫 (正式写手)
某些buffer的成分影响了你测蛋白的准确性

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5楼2018-06-09 09:16:17
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Crazy cat

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by liyao1992 at 2018-06-08 15:52:30
三角摇瓶培养的，600ml发酵液，最后80%硫酸铵沉淀得到100mg的沉淀，配成1mg/ml的溶液测蛋白后，发现蛋白含量只有20多ug/ml，多糖含量忽略不计，现在就是不知道硫酸铵沉淀下来的到底是不是蛋白质
...

跑PAGE胶考染看看，如果用吸光度或者仪器测得话可能会不准确，如果你是说目的蛋白只有20多ug的话，可能是有相近等电点的蛋白。。。
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6楼2018-06-12 09:10:27
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Crazy cat

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by liyao1992 at 2018-06-08 15:53:32
硫酸铵沉淀离心后也用缓冲液透析了一个晚上，透析期间换了3次缓冲液
...

你是说溶解之后透析了？
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7楼2018-06-12 09:13:33
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刘曦lxlx

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8楼2018-06-25 17:00:30
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liyao1992

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9楼2018-06-28 00:32:28
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