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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 纯化浓缩后的蛋白质放-80用什么缓冲液保存呀?
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草哥cium

新虫 (正式写手)

[求助] 纯化浓缩后的蛋白质放-80用什么缓冲液保存呀? 已有3人参与

老哥们。。我蛋白质等电点6.1。。左右。
25kd大小，。。是上清表达的具有活性的。。想问问这种情况想保存差不多一两个月。。怎么保存好呀。。。需要加什么东西

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1楼 2018-06-04 16:20:52
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863828916

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
加5%以上的甘油即可，分装多管之后，使用液氮速冻之后-80%保存几年没问题，使用的时候没出用一管，避免反复冻融。也可以加入50%左右甘油冻-20%，前提是加入甘油尽量保证缓冲液和盐浓度不要变化太大
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6楼2018-06-04 17:49:59
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普通回帖

wuhu0612331

铜虫 (正式写手)
我们以前是在纯化后的缓冲液里加终浓度50%的甘油，液氮瞬间冷冻后放-80度

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2楼2018-06-04 16:39:07
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chen_xiao_xu

银虫 (正式写手)
甘油啥的，在不影响你后期实验或者使用的情况下，加些保护剂，放到-80冰箱

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3楼2018-06-04 16:46:17
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chen_xiao_xu

银虫 (正式写手)
还有注意保存浓度，别浓度过大，聚集沉淀

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4楼2018-06-04 16:46:49
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草哥cium

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by chen_xiao_xu at 2018-06-04 16:46:17
甘油啥的，在不影响你后期实验或者使用的情况下，加些保护剂，放到-80冰箱

缓冲液用啥好捏。。就当初的elution buffer咩。。

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5楼2018-06-04 17:01:01
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chen_xiao_xu

银虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 草哥cium at 2018-06-04 17:01:01
缓冲液用啥好捏。。就当初的elution buffer咩。。
...

不行，上网查查吧，好多的

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7楼2018-06-04 21:10:02
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PBS，50%甘油，叠氮钠，-20℃就可以，这和酶试剂一样一样滴
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8楼2018-06-05 23:45:50
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
要加0.2%叠氮钠防腐，加10%的甘油，加0.1%的Trtion X-100,负20度几个月没问题，有二硫键了在加1mM的DTT。
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9楼2018-06-06 16:41:42
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Cherishqj

铜虫 (小有名气)
楼主，我有同样的问题，请问你用什么缓冲液保存的
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10楼2019-05-08 14:19:32
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