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草哥cium

新虫 (正式写手)

[求助] 纯化浓缩后的蛋白质放-80用什么缓冲液保存呀? 已有3人参与

老哥们。。我蛋白质等电点6.1。。左右。
25kd大小,。。是上清表达的具有活性的。。想问问这种情况想保存差不多一两个月。。怎么保存好呀。。。需要加什么东西

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863828916

金虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
加5%以上的甘油即可,分装多管之后,使用液氮速冻之后-80%保存几年没问题,使用的时候没出用一管,避免反复冻融。也可以加入50%左右甘油冻-20%,前提是加入甘油尽量保证缓冲液和盐浓度不要变化太大
6楼2018-06-04 17:49:59
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普通回帖

wuhu0612331

铜虫 (正式写手)

我们以前是在纯化后的缓冲液里加终浓度50%的甘油,液氮瞬间冷冻后放-80度

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2楼2018-06-04 16:39:07
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chen_xiao_xu

银虫 (正式写手)

甘油啥的,在不影响你后期实验或者使用的情况下,加些保护剂,放到-80冰箱

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3楼2018-06-04 16:46:17
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chen_xiao_xu

银虫 (正式写手)

还有注意保存浓度,别浓度过大,聚集沉淀

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4楼2018-06-04 16:46:49
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草哥cium

新虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by chen_xiao_xu at 2018-06-04 16:46:17
甘油啥的,在不影响你后期实验或者使用的情况下,加些保护剂,放到-80冰箱

缓冲液用啥好捏。。就当初的elution buffer咩。。

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5楼2018-06-04 17:01:01
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chen_xiao_xu

银虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 草哥cium at 2018-06-04 17:01:01
缓冲液用啥好捏。。就当初的elution buffer咩。。
...

不行,上网查查吧,好多的

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7楼2018-06-04 21:10:02
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
PBS,50%甘油,叠氮钠,-20℃就可以,这和酶试剂一样一样滴
8楼2018-06-05 23:45:50
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
要加0.2%叠氮钠防腐,加10%的甘油,加0.1%的Trtion X-100,负20度几个月没问题,有二硫键了在加1mM的DTT。
9楼2018-06-06 16:41:42
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Cherishqj

铜虫 (小有名气)

楼主,我有同样的问题,请问你用什么缓冲液保存的
10楼2019-05-08 14:19:32
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