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就不信还有人

新虫 (初入文坛)

[交流] 敲除后磷酸化蛋白表达已有2人参与

我是利用Cas 9敲除掉某个基因,筛选了单克隆,也利用基因测序验证(杂合子)了,但是该蛋白的磷酸化蛋白还是能在细胞中检测到(WB )。请问有人遇到跟我一样的问题吗?

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memorize1991

木虫 (正式写手)


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一般细胞是二倍体吧,你就算敲掉了一个基因,它等位基因也会表达啊。就算你是用慢病毒筛的,后面用相应抗生素筛选也可能不是双敲的。最好的是对多个单克隆检测你要敲的基因的cDNA是不是没有。我也遇到这个情况,老板就这么解释的,看你有什么好办法没,给我参考一下~~老板也让我敲一个细胞的糖基化修饰基因

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2楼2018-05-25 18:56:49
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天使在忧郁

禁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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3楼2018-08-17 14:27:00
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