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Nec99新虫 (小有名气)
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荧光定量结果看哪些指标分析没有问题？ 已有1人参与
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我想知道看哪些指标知道我做的荧光定量没有问题？ 发自小木虫IOS客户端 |
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用户晓晓
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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这个最重要的几个指标是（拿到报告一般按照下面的次序来看数据）： 1，溶解曲线，一个孔必须是单峰，且同一基因峰重合，且峰比较锐利。 2，扩增曲线圆滑，最终要有比较明显的平台期。 3，看CT值得范围（荧光定量CT值一般应该落在一个比较合适的范围，可能机器不同这个范围也不同，我自己的经验是CT值在15-30比较合理，太小或者太大都不会很准确） 4，也是最重要的就是看复孔（技术重复）之间的Cq error，大于0.4 我就不太能接受。 5，生物学重复之间的差异（或者就是说组间差异，这个可能跟qPCR没有啥关系，主要跟你的实验，样品情况有关，但是也是实验数据最终是否能采用的重要指标） 荧光定量是比较敏感的实验，重复实验是很有必要的！ 有问题欢迎交流！ 祝楼主实验顺利！ |
2楼2018-05-24 09:33:47