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Nec99

新虫 (小有名气)

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[交流] 荧光定量结果看哪些指标分析没有问题？已有1人参与

我想知道看哪些指标知道我做的荧光定量没有问题？

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1楼 2018-05-24 09:08:40

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

用户晓晓

木虫 (正式写手)

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这个最重要的几个指标是（拿到报告一般按照下面的次序来看数据）：

1，溶解曲线，一个孔必须是单峰，且同一基因峰重合，且峰比较锐利。

2，扩增曲线圆滑，最终要有比较明显的平台期。

3，看CT值得范围（荧光定量CT值一般应该落在一个比较合适的范围，可能机器不同这个范围也不同，我自己的经验是CT值在15-30比较合理，太小或者太大都不会很准确）

4，也是最重要的就是看复孔（技术重复）之间的Cq error，大于0.4 我就不太能接受。

5，生物学重复之间的差异（或者就是说组间差异，这个可能跟qPCR没有啥关系，主要跟你的实验，样品情况有关，但是也是实验数据最终是否能采用的重要指标）

荧光定量是比较敏感的实验，重复实验是很有必要的！

有问题欢迎交流！

祝楼主实验顺利！

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