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uenzyme

银虫 (小有名气)

[求助] 提取RNA,最后忘记用75%的酒精洗了,直接溶在水里了,怎么办? 已有1人参与

提取RNA,最后忘记用75%的酒精洗了,直接溶在水里了,怎么办?后续影响会不会很大?
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hxyang

铁杆木虫 (著名写手)

可以加过量的75%的乙醇去洗,加的几十ul的水稀释不了太多乙醇浓度的

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2楼2018-05-23 21:56:15
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yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)


换算下加100%乙醇不就调成75%乙醇了

发自小木虫IOS客户端
3楼2018-05-24 11:52:51
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uenzyme

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yubeihong at 2018-05-24 11:52:51
换算下加100%乙醇不就调成75%乙醇了

RNA遇水就溶解了啊。看不到了,还能再萃出来么。。
4楼2018-05-25 10:20:21
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uenzyme

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hxyang at 2018-05-23 21:56:15
可以加过量的75%的乙醇去洗,加的几十ul的水稀释不了太多乙醇浓度的

我是去掉 isopropanol之后直接用水溶解了。。。加乙醇还能析出已经溶解了的RNA吗?
5楼2018-05-25 10:23:53
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leister

新虫 (小有名气)

网上查一下RNA沉淀浓缩的方法

发自小木虫Android客户端
6楼2018-05-25 16:57:40
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hkj710

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
uenzyme: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2018-06-21 15:27:06
不加75%的乙醇洗RNA沉淀,最后的结果就是RNA溶液中盐浓度太高,可能后影响后续的反应。不放心的话,可以加异丙醇或者酒精重新沉淀就可以了
7楼2018-06-01 08:53:23
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石头吃鱼

新虫 (初入文坛)

直接加无水乙醇一般不会沉淀出RNA,可能要在-80放几个小时,离心后会得到,但是也不确定。
最好是加1/10体积的 3M 醋酸钠,然后加乙醇,然后可能会沉淀出
8楼2021-07-15 17:59:16
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山舞银蛇

铁杆木虫 (正式写手)

看你溶进多少水里了,按你洗脱液体积,再加4倍或者更多的乙醇,12000rpm离心一下,更多的乙醇,回收率会更高一些
核酸提取与Taqman诊断
9楼2021-07-16 17:13:57
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atikou

铜虫 (小有名气)

在Trizol提取RNA的过程中,有一个步骤是加入氯仿,混匀后离心取上清。这一步的上清其实就是RNA在水中,然后加入异丙醇进行沉淀,你可以把你加入水的这一个过程想象成Trizol萃取后的水相,重新加入异丙醇进行沉淀,然后再用乙醇洗涤就行了。
-----------来自深圳市易基因的回复
10楼2022-03-26 17:33:20
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