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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » ccdB载体构建
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321wangke321

金虫 (正式写手)

[交流] ccdB载体构建 已有2人参与

请问ccdB序列有开放阅读框有306bp，构建有效ccdb载体还需要引入多余的序列吗？有文献用的ccdb长达700多，哪位能告知是怎么回事？

另外谁有含有ccdb的质粒，可以交换或者有偿。谢谢了。急着毕业～

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王者风范，一切皆有可能。
1楼 2018-05-22 21:29:31
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donkey2014

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
您好 ，我有含有ccdb基因的质粒pDest17，pDonr207，pAd BLOCK-iT-DEST RNAi Gateway Vector，pAd CMV V5-DEST，有需要可以私信哦
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2楼2018-05-23 08:29:32
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kangaroo0513

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
一般ccdB基因是用于杀原核细胞的，因此需要前面有原核启动子，达到降低插入目的片段后的质粒转化背景的目的。另外，为了（1）避免该质粒自身重组丢失ccdB部分（2）增加选择标记，一般还会在ccdB前加一个氯霉素抗性标记CmR，用于细菌中更有效扩增筛选。

我们有含有整个表达框（启动子-CmR-ccdB）的载体，有需要的话可以站短。后面再连入自己的基因的时候，可以把整个表达框切除，换行你的gene。
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3楼2018-05-23 11:20:02
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