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心死后死心

铜虫 (初入文坛)

[求助] 如何新建酶切位点已有1人参与

我有一个目的片段需要连到PC1300上, 片段两端的酶切位点与1300上的不同(有两个刚好顺序是反的)  不知道怎么样才能在1300中增加相应的酶切位点,还请各路大神指教
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MAS_rice

至尊木虫 (著名写手)

竹杖芒鞋轻胜马,谁怕,一蓑烟雨任平生;回首向来萧瑟处,归去,也无风雨也无晴
2楼2018-05-21 21:29:33
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niil

金虫 (正式写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-08-12 09:11:18
重新设计引物扩增目标片段,在设计引物的时候加上合适的酶切位点

发自小木虫Android客户端
Stop fighting,let it flow.
3楼2018-05-21 22:14:35
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snhajn

新虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by niil at 2018-05-21 22:14:35
重新设计引物扩增目标片段,在设计引物的时候加上合适的酶切位点

然后可以对pcr产物直接酶切吗?需要胶回收或者纯化吗?用加保护碱基吗

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4楼2018-05-21 23:15:21
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niil

金虫 (正式写手)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-08-12 09:11:35
需要加保护碱基,PCR产物单一的话,不用回收,直接取适量酶切,然后灭活限制酶,也不用回收,直接取适量加载体骨架连接就行了

发自小木虫Android客户端
Stop fighting,let it flow.
5楼2018-05-22 08:46:28
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汐尔于

新虫 (正式写手)

6楼2018-08-11 16:50:18
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macgray11

禁虫 (小有名气)

★ ★
心死后死心(渊博震天代发): 金币+2, 感谢提供方法建议 2018-09-11 16:06:40
本帖内容被屏蔽

7楼2018-08-13 13:54:35
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汐尔于

新虫 (正式写手)

8楼2018-09-11 12:19:31
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