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zhao520215

新虫 (小有名气)

[求助] 如何将培养好的成熟真菌菌丝体表面残留的培养基及杂质清洗干净? 已有1人参与

如何将培养好的成熟真菌菌丝体表面残留的培养基及杂质清洗干净?本人在做用真菌菌丝球吸附水中重金属,因为不洗干净的话,加入重金属溶液后会与真菌表面的残留培养基成分形成沉淀,影响实验结果。请有经验的大神指教!
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4225

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是不是可以在培养基表面覆一层玻璃纸,接种在玻璃纸上,待菌丝体长至需要收集玻璃纸上的菌丝?
2楼2018-05-22 16:41:17
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zhao520215

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 4225 at 2018-05-22 16:41:17
是不是可以在培养基表面覆一层玻璃纸,接种在玻璃纸上,待菌丝体长至需要收集玻璃纸上的菌丝?

我用的是液体培养基,培养成菌丝球,整个过程中需要以一定的转速摇,应该不能放玻璃纸吧,谢谢啦!

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3楼2018-05-22 22:50:11
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4225

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhao520215 at 2018-05-22 22:50:11
我用的是液体培养基,培养成菌丝球,整个过程中需要以一定的转速摇,应该不能放玻璃纸吧,谢谢啦!
...

液体培养基不能覆玻璃纸的。液体培养的菌球不能用稳渗液洗干净吗?稳渗液清洗-无菌滤纸吸干-稳渗液清洗-无菌滤纸吸干-...,不能达到实验要求的洁净程度吗?

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4楼2018-05-23 11:41:44
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三叶虫122

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhao520215 at 2018-05-22 22:50:11
我用的是液体培养基,培养成菌丝球,整个过程中需要以一定的转速摇,应该不能放玻璃纸吧,谢谢啦!
...

把抽滤器消毒,无菌条件下,把菌液移至漏斗上,无菌水反复洗,2-5倍的无菌水即可洗干净

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

5楼2018-05-23 14:44:58
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zhao520215

新虫 (小有名气)

送红花一朵
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5楼: Originally posted by 三叶虫122 at 2018-05-23 14:44:58
把抽滤器消毒,无菌条件下,把菌液移至漏斗上,无菌水反复洗,2-5倍的无菌水即可洗干净...

您的意思是用漏斗过滤完后,留在滤纸上的菌体用无菌水反复冲洗几次?这样能把菌丝上吸附的盐离子洗干净吗?

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6楼2018-05-24 14:46:14
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zhao520215

新虫 (小有名气)

送红花一朵
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4楼: Originally posted by 4225 at 2018-05-23 11:41:44
液体培养基不能覆玻璃纸的。液体培养的菌球不能用稳渗液洗干净吗?稳渗液清洗-无菌滤纸吸干-稳渗液清洗-无菌滤纸吸干-...,不能达到实验要求的洁净程度吗?...

稳渗液是磷酸缓冲液吗?洗的时候具体是怎么操作的?把菌体过滤出来后置于稳渗液中,然后再过滤?

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7楼2018-05-24 14:49:01
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4225

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by zhao520215 at 2018-05-24 14:49:01
稳渗液是磷酸缓冲液吗?洗的时候具体是怎么操作的?把菌体过滤出来后置于稳渗液中,然后再过滤?
...

如果你要洗掉菌丝携带的培养基中的盐离子那只能用无菌水洗了,多清洗几次就好了(注意保证无菌),如果持续时间长可以用稳渗液漂洗啊(看下资料找到适合维持你做的真菌状态的无菌buffer),过滤菌丝后用buffer清洗,我没有试过楼上冲洗的,我都是转移到50mL无菌EP管洗,每洗一次可以用无菌滤纸吸一下水分再进行下一步漂洗(此步骤易导致污染,而且有可能损伤菌丝,重金属对断裂菌丝影响还是蛮大的不知道会不会影响你后续实验,如果实验允许多次漂洗可以不做吸干这一步,像你说的过滤-置于稳渗液清洗-过滤-置于稳渗液清洗,多洗几次就好了)。
8楼2018-05-24 17:35:01
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zhao520215

新虫 (小有名气)

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8楼: Originally posted by 4225 at 2018-05-24 17:35:01
如果你要洗掉菌丝携带的培养基中的盐离子那只能用无菌水洗了,多清洗几次就好了(注意保证无菌),如果持续时间长可以用稳渗液漂洗啊(看下资料找到适合维持你做的真菌状态的无菌buffer),过滤菌丝后用buffer清洗 ...

嗯嗯,我试试清洗多次

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9楼2018-05-24 18:10:52
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做自己的主人

新虫 (小有名气)

楼主是做真菌的吗?是在哪里?可以求助一下帮忙培养吗?

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10楼2018-05-26 22:28:24
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