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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 如何将培养好的成熟真菌菌丝体表面残留的培养基及杂质清洗干净？
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zhao520215

新虫 (小有名气)

[求助] 如何将培养好的成熟真菌菌丝体表面残留的培养基及杂质清洗干净？ 已有1人参与

如何将培养好的成熟真菌菌丝体表面残留的培养基及杂质清洗干净？本人在做用真菌菌丝球吸附水中重金属，因为不洗干净的话，加入重金属溶液后会与真菌表面的残留培养基成分形成沉淀，影响实验结果。请有经验的大神指教！
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1楼 2018-05-21 15:45:53
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4225

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是可以在培养基表面覆一层玻璃纸，接种在玻璃纸上，待菌丝体长至需要收集玻璃纸上的菌丝？
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2楼2018-05-22 16:41:17
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zhao520215

新虫 (小有名气)
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2楼: Originally posted by 4225 at 2018-05-22 16:41:17
是不是可以在培养基表面覆一层玻璃纸，接种在玻璃纸上，待菌丝体长至需要收集玻璃纸上的菌丝？

我用的是液体培养基，培养成菌丝球，整个过程中需要以一定的转速摇，应该不能放玻璃纸吧，谢谢啦！

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3楼2018-05-22 22:50:11
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4225

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhao520215 at 2018-05-22 22:50:11
我用的是液体培养基，培养成菌丝球，整个过程中需要以一定的转速摇，应该不能放玻璃纸吧，谢谢啦！
...

液体培养基不能覆玻璃纸的。液体培养的菌球不能用稳渗液洗干净吗？稳渗液清洗-无菌滤纸吸干-稳渗液清洗-无菌滤纸吸干-...，不能达到实验要求的洁净程度吗?
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zhao520215
4楼2018-05-23 11:41:44
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三叶虫122

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhao520215 at 2018-05-22 22:50:11
我用的是液体培养基，培养成菌丝球，整个过程中需要以一定的转速摇，应该不能放玻璃纸吧，谢谢啦！
...

把抽滤器消毒，无菌条件下，把菌液移至漏斗上，无菌水反复洗，2-5倍的无菌水即可洗干净
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zhao520215
5楼2018-05-23 14:44:58
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zhao520215

新虫 (小有名气)
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5楼: Originally posted by 三叶虫122 at 2018-05-23 14:44:58
把抽滤器消毒，无菌条件下，把菌液移至漏斗上，无菌水反复洗，2-5倍的无菌水即可洗干净...

您的意思是用漏斗过滤完后，留在滤纸上的菌体用无菌水反复冲洗几次？这样能把菌丝上吸附的盐离子洗干净吗？

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6楼2018-05-24 14:46:14
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zhao520215

新虫 (小有名气)
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4楼: Originally posted by 4225 at 2018-05-23 11:41:44
液体培养基不能覆玻璃纸的。液体培养的菌球不能用稳渗液洗干净吗？稳渗液清洗-无菌滤纸吸干-稳渗液清洗-无菌滤纸吸干-...，不能达到实验要求的洁净程度吗?...

稳渗液是磷酸缓冲液吗？洗的时候具体是怎么操作的？把菌体过滤出来后置于稳渗液中，然后再过滤？

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7楼2018-05-24 14:49:01
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4225

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by zhao520215 at 2018-05-24 14:49:01
稳渗液是磷酸缓冲液吗？洗的时候具体是怎么操作的？把菌体过滤出来后置于稳渗液中，然后再过滤？
...

如果你要洗掉菌丝携带的培养基中的盐离子那只能用无菌水洗了，多清洗几次就好了（注意保证无菌），如果持续时间长可以用稳渗液漂洗啊（看下资料找到适合维持你做的真菌状态的无菌buffer），过滤菌丝后用buffer清洗，我没有试过楼上冲洗的，我都是转移到50mL无菌EP管洗，每洗一次可以用无菌滤纸吸一下水分再进行下一步漂洗（此步骤易导致污染，而且有可能损伤菌丝，重金属对断裂菌丝影响还是蛮大的不知道会不会影响你后续实验，如果实验允许多次漂洗可以不做吸干这一步，像你说的过滤-置于稳渗液清洗-过滤-置于稳渗液清洗，多洗几次就好了）。
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8楼2018-05-24 17:35:01
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zhao520215

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 4225 at 2018-05-24 17:35:01
如果你要洗掉菌丝携带的培养基中的盐离子那只能用无菌水洗了，多清洗几次就好了（注意保证无菌），如果持续时间长可以用稳渗液漂洗啊（看下资料找到适合维持你做的真菌状态的无菌buffer），过滤菌丝后用buffer清洗 ...

嗯嗯，我试试清洗多次

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9楼2018-05-24 18:10:52
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做自己的主人

新虫 (小有名气)
楼主是做真菌的吗？是在哪里？可以求助一下帮忙培养吗？

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10楼2018-05-26 22:28:24
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