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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 质粒转化农杆菌，验证出现双带，一条是目的片段大小的条带
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天涯盖

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒转化农杆菌，验证出现双带，一条是目的片段大小的条带

之前用质粒转化大肠杆菌，验证是单条带，提质粒转化农杆菌后，用同样的引物验证却出现两条带，一条是目的条带大小，一条是在目的条带上面，什么原因，求大神解决

@youlinglyw @biostar2009 发自小木虫Android客户端
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1楼 2018-05-19 23:24:18
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yudaoqian88

至尊木虫 (知名作家)

不良人
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2018-05-21 07:57:43
要大很多嘛？一般的表达载体都在10000以上，应该不是环形载体的全扩增产物，你拿个空的农杆菌做个对照，看是不是因为菌体本身的非特异扩增所致！！！

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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

天涯盖
特别喜欢家门口开门的瞬间，宝宝那个高兴呀，蹦蹦跳跳，好不热闹！
2楼2018-05-20 00:45:11
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天涯盖

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by yudaoqian88 at 2018-05-20 00:45:11
要大很多嘛？一般的表达载体都在10000以上，应该不是环形载体的全扩增产物，你拿个空的农杆菌做个对照，看是不是因为菌体本身的非特异扩增所致！！！

一条1000左右，是目的片段长度，另一条2000左右。我再试试看是不是非特异性扩增

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3楼2018-05-20 10:25:22
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前行的璐

新虫 (小有名气)
有可能是农杆菌体内的导致的，我之前也出现过这种情况
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4楼2018-05-20 21:38:22
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