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草哥cium新虫 (正式写手)
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[求助]
iptg诱导浓度 已有1人参与
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最近跑sds page..发现20uM终浓度的iptg都诱导出 目的蛋白了。(1M的iptg 加0.1u到5ml的菌液里)。。。大神们，我是不是要继续分组来找iptg的最低诱导浓度哇，我看网上0.1mM的浓度就可以做啦 @hc-material @gyesang 发自小木虫Android客户端 |
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
草哥cium: 金币+15 2018-05-17 07:53:49
感谢参与，应助指数 +1
草哥cium: 金币+15 2018-05-17 07:53:49
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如果给的信息再多些就更好了 一般IPTG用的浓度在0.1到2mM的终浓度，我们一般从0.5mM的终浓度起始来尝试诱导的效果 你说20 uM都诱导的很明显的话，可能是你的蛋白确实非常好表达，低浓度即可，另一方面不知道你在扩培时是否添加葡萄糖来抑制本底表达，如果没有加，可能会有比较明显的渗漏表达 对于IPTG的最低浓度，一般我们不会非要苛求去寻找最低浓度，只要蛋白是表达在上清里，为可溶性表达，而且表达量足够，即可，哪怕沉淀里有，而且很多也没有关系，你纯化出的蛋白下游肯定还有相关验证试验来检测其活性的 祝好！ |
2楼2018-05-16 19:30:33