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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » cDNA保守区的克隆，急！
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x8q4h11

木虫 (小有名气)

[交流] cDNA保守区的克隆，急！

各位虫友，大家好。想请教一下，未报道基因（其他物种的这类基因序列有报道，我要的物种的同种基因序列未报道）cDNA保守区如何克隆？另外，对保守区的概念不太懂，谢谢。

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-7 at 20:24 ]
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1楼 2009-03-23 17:02:43
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小猫三两只

金虫 (正式写手)
★ ★
sutao1979(金币+2,VIP+0):谢谢参与 3-25 02:13
先把与其相似的物种的这些基因在NCBI里比对一下,找出同源性较高的序列也即保守区,根据这些保守区设计引物扩增出一段序列(就是同源克隆的方法),再以这段序列(可能较长,也可能比较短)为模板扩出全长.
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2楼2009-03-23 19:01:15
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x8q4h11

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 小猫三两只 at 2009-3-23 19:01:
先把与其相似的物种的这些基因在NCBI里比对一下,找出同源性较高的序列也即保守区,根据这些保守区设计引物扩增出一段序列(就是同源克隆的方法),再以这段序列(可能较长,也可能比较短)为模板扩出全长.

谢谢。以“这段序列”为模板怎么扩出权长啊？请高手指教。
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3楼2009-03-23 19:16:56
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小猫三两只

金虫 (正式写手)
这个就是根据片段扩出全长,也有很多种方法,比如电子克隆,或者采用RACE法,这方面的文献很多的,多看看文章,就会了.
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4楼2009-03-23 19:39:38
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x8q4h11

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 小猫三两只 at 2009-3-23 19:39:
这个就是根据片段扩出全长,也有很多种方法,比如电子克隆,或者采用RACE法,这方面的文献很多的,多看看文章,就会了.

谢谢
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5楼2009-03-24 19:57:20
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