4楼: Originally posted by 用户晓晓 at 2018-05-13 20:22:05
信号肽主要是引导蛋白质跨越细胞膜的一段疏水性肽段，是否需要切除需要考虑两方面的事情：

1，如果该肽段位于N端起始，那么这个信号肽序列一般不参与蛋白三级结构的折叠，且在完成跨膜作用之后一般会被酶水解，也 ...

5楼: Originally posted by maoniuniu at 2018-05-16 23:07:04
这几个因素确实可以考虑，但楼主提到是在蛋白互作实验中是否要去除，这样出发的角度可能不同

对于蛋白互作，如果是in vivo的实验，比如楼主提到的BiFc，又或者是常做的Co-IP等等，这类实验目的是要验证在体内天 ...

6楼: Originally posted by 用户晓晓 at 2018-05-16 22:55:51
不不，既然要体外表达，就只是模拟自然状态，我回答的还是可以考虑。除非是做自然状态下的pull down ，依靠抗体来捕捉天然蛋白，那就没有必要询问这个问题。既然问了是否要改造，就说明楼主要体外表达这个蛋白，可 ...

8楼: Originally posted by maoniuniu at 2018-05-17 12:47:23

我们的分歧可能还是楼主给的信息太少，假如给个具体的例子我们来分析，可能我们就没有分歧了
但in vivo的情况，我指的是说比如你要在arabidopsis的体系（原生质体或者转基因苗）中分析arabidopsis的基因，又 ...

9楼: Originally posted by 用户晓晓 at 2018-05-17 09:08:15
对滴，说的很有道理！做定位的话最好就能找到特异性的抗体，直接做原位表达。不过这个蛋白既然有信号肽，目测是个分泌型蛋白，定位有难度。。。
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